Acta Pharmaceutica, Vol. 55 No. 1, 2005.
Izvorni znanstveni članak
Brza i osjetljiva HPLC metoda za određivanje doksorubicina u krvi psa Artifakt srebrovog nitrata
LAKKIREDDY HARIVARDHAN REDDY
NAGESH MEDA
R. S. R. MURTHY
Sažetak
Razvijena je i validirana brza i osjetljiva metoda visokotlačne tekućinske kromatografije (HPLC) s fluorimetrijskom detekcijom za određivanje doksorubicina u krvi psa. Nakon obrade uzoraka krvi koji sadrže doksorubicin s AgNO3 (taložno sredstvo za proteine), uz osnovni signal (tR = 5,5min) pojavljuje se dodatni signal u kromatogramu doksorubicina na 11,5 min. Nikakav dodatni signal se ne pojavljuje ako se za taloženje proteina upotrijebe trikloroctena kiselina ili metanol. Međutim, u hemoliziranim uzorcima plazme kojima je dodan doksorubicin nakon obrade sa srebrovim nitratom pojavljuje se drugi signal. Kalibracijska krivulja s površinom ispod signala za samo prvi pik (tR = 5,5min) nije linearna. Međutim, suma površina ispod prvog (tR = 5.5min) i drugog signala (tR = 11.5min) daje linearnu zavisnost s korelacijskim koeficijentom R2 = 0,9985. Pojava drugog signala mogla bi biti posljedica interakcije doksorubicina sa staničnim komponentama u krvi u prisutnosti AgNO3 te nastajanja kompleksa smanjene polarnosti. Površina ispod signala na kromatogramu određena na temelju fluorescencijske detekcije na 480 nm i 560 nm (valne duljine pobuđivanja, odnosno emisije) upotrebljena je za kvantitativnu analizu doksorubicina. Određivanje doksorubicina u krvi psa je jednostavna, precizna i točna. U svim eksperimentima, relativna standardna devijacija (RSD) najčešće je bila < 10%, a izmjerena i teorijska koncentracija razlikovala se za < 10%. Doksorubicin inkubiran s uzorcima krvi psa bio je stabilan najmanje 3 dana ako je čuvan na 5 °C, odnosno najmanje 8 h ako je čuvan na sobnoj temperaturi (28 °C). Predložena HPLC metoda mogla bi imati prednosti u određivanju doksorubicina u sustavima za isporuku lijekova ciljano u krvne stanice i kvantifikaciji ukupne koncentracije doksorubicina u krvi.
Ključne riječi
doksorubicin; HPLC; srebrov nitrat; krv psa; plazma psa; fluorescencijska detekcija
Hrčak ID:
16747
URI
Datum izdavanja:
1.3.2005.
Posjeta: 4.319 *