Izvorni znanstveni članak
Uporaba jednostavnih i miješanih reverznih micela za enzimsku sintezu alkilnih glikozida – ekološki prihvatljivih površinski aktivnih tvari
Irina Mladenoska
orcid.org/0000-0003-3274-9158
; University Sts Cyril and Methodius, Faculty of Technology and Metallurgy, Department of Biotechnology and Food Technology, Rudjer Boskovic 16, MK-1000 Skopje, Republic of Macedonia
Sažetak
U radu su istražena dva tipa mikroemulzijskih reakcijskih sustava, i to jednostavne i miješane reverzne micele, kao potencijalni bioreaktori za transglikozilaciju kataliziranu pomoću tri mikrobne β-galaktozidaze: iz plijesni Aspergillus oryzae, kvasca Kluyveromyces marxianus i bakterije Escherichia coli. Ispitani su sljedeći parametri: utjecaj stupnja hidratacije na ukupnu enzimsku aktivnost, selektivnost enzima spram donora glikonske grupe, kakvoća međufazne površine jednostavnih i miješanih micela, te utjecaj dodatka neionskih pomoćnih površinski aktivnih tvari na aktivnost enzima. Kao aktivirani supstrati upotrijebljeni su p-nitrofenil-β-D-galaktozid i p-nitrofenil-β-D-glukozid. Ukupna aktivnost sva tri enzima u sustavima reverznih micela pokazuje jaku ovisnost o stupnju hidratacije, a najveća je kad je stupanj hidratacije blizu zasićenja. Najveća aktivnost β-galaktozidaze iz A. oryzae u jednostavnim micelama bila je 1.8 mmol/(min∙mg proteina). Omjer aktivnosti β-galaktozidaze i β-glukozidaze bio je veći od 1 za sva tri enzima uklopljena u jednostavnim micelama, što znači da je njihova selektivnost prema p-nitrofenil-β-galaktozidu kao donoru glikonske grupe bila izrazita i veća od one prema p-nitrofenil-β-glukozidu. Taj je omjer za β-galaktozidazu iz A. oryzae bio 1.68. Dodatak neionskih pomoćnih površinski aktivnih tvari pozitivno je utjecao na enzimsku aktivnost. Ukupna aktivnost β-galaktozidaze iz A. oryzae u micelama sastavljenim od dioktil natrijevog sulfosukcinata i polietilen glikola (AOT/PEG) masenog omjera ζ(AOT, PEG)=1 bila je 1.5 puta veća, a u AOT/Tween micelama masenog omjera ζ(AOT, Tween)=0.033 čak više od 3.5 puta veća od aktivnosti enzima uklopljenog u jednostavnim micelama. Aktivnost β-galaktozidaze iz A. oryzae uklopljene u micelama je čak 4.22 puta veća od one sirovog (nepročišćenog) enzimskog preparata.
Ključne riječi
jednostavne reverzne micele; miješane reverzne micele; enzimska sinteza; alkilni glikozidi; površinski aktivne tvari
Hrčak ID:
94493
URI
Datum izdavanja:
27.12.2012.
Posjeta: 1.659 *