Pregledni rad
https://doi.org/10.2478/v10004-007-0027-1
Primjena tehnologije rekombinantne DNA za pripravke kolinesteraza kao antidota i detektora organofosfata
Palmer Taylor
Elsa Reiner
Zrinka Kovarik
Zoran Radić
Sažetak
Razvijajući novi pristup sintezi antidota pri otrovanju organofosfatima kao i njihovu detekciju, primijenili smo metode rekombinantne DNA za pripremu kolinesteraza s neuobičajenim svojstvima. Za antidotsku terapiju istražili smo mutacije prirodnih enzima miša i čovjeka koje povećavaju brzine reaktivacije oksimom. Takvi enzimi bi po unosu u cirkulaciju postali katalitički, a ne samo stehiometrijski odstranjivači organofosfata. Na taj način “oksimom potpomognuta kataliza” omogućava čišćenje organofosfata iz cirkulacije umanjujući prodiranje organofosfata u tkiva i njihovu toksičnost. Prema tome, oksim kao antidot ima dvojaku ulogu: u cirkulaciji i na razini tkiva. S druge strane, uporabom novog sintetskog pristupa u oblikovanju biološki aktivnih spojeva poznatog kao “klik kemija” diskretnih proteinskih konformacija, organofosforilirani konjugati acetilkolinesteraze služe kao kalup u sintezi novih nukleofilnih reaktivatora. Naposljetku, acetilkolinesteraza se može mutagenezom modificirati uvo|enjem cisteina na koje se mogu vezati fluorofori. Fluorofori uvedeni na određena mjesta u molekuli acetilkolinesteraze mijenjaju svoja fluorescentna svojstva pri konjugaciji organofosfata s enzimom koji na taj način od objekta djelovanja insekticida i živčanih bojnih otrova postaje molekula za detekciju izloženosti organofosfatima.
Ključne riječi
acetilkolinesteraza; antidoti; detekcija; fluorescentna acetilkolinesteraza; in situ - klik kemija; kalup-dizajn lijekova; kataliza potpomognuta oksimom; kinetika reaktivacije; organofosfatni inhibitori
Hrčak ID:
16533
URI
Datum izdavanja:
26.9.2007.
Posjeta: 2.411 *