Izvorni znanstveni članak
IZRAČUN RELATIVNE KOLIČINE GRNK ZA KOKOŠJI IFN-g NAKON STIMULACIJE VIRUSOM NEWCASTLESKE BOLESTI SOJ LA SOTA
Mirta Balenović
; Hrvatski veterinarski institut, Centar za peradarstvo, Heinzelova 55, Zagreb, Hrvatska
V. Savić
; Hrvatski veterinarski institut, Centar za peradarstvo, Heinzelova 55, Zagreb, Hrvatska
Anamaria Ekert Kabalin
; Zavod za stočarstvo, Veterinarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu, Heinzelova 55, Zagreb, Hrvatska
L. Jurinović
; Hrvatski veterinarski institut, Centar za peradarstvo, Heinzelova 55, Zagreb, Hrvatska
Sažetak
Jedan od značajnih preduvjeta uspješne intenzivne peradarske proizvodnje je zdrava i imunokompetentna perad. Zbog toga je veliki interes za razumijevanje uloge stanične imunosti, odnosno uloge imunosnih stanica i molekula uključenih u staničnu imunost i to u cilju postizanja što boljeg imunosnog odziva. Razvojem molekularnih metoda omogućeno je praćenje kinetike imunosnih molekula kroz vremensko razdoblje na stimulans imunogenom. U istraživanju je određena dinamika tvorbe interferona γ (IFN-γ) u slezenama kokošjih embrija inokuliralih virusom newcastleske bolesti (NB) soja La Sota. Standardna krivulja pripremljena je u deseterostrukim serijskim razrjeđenjima naše dobivene pozitivne kontrole gRNK za IFN-γ. Pomoću usporedivih reakcija proizvoda procijenjen je broj kopija u uzorku iz vrijednosti praga ciklusa, odnosno ciklusa u kojem je promijenjena reporter boja. Prema dobivenim rezultatima za deseterostruka serijska razrjeđenja matematičkim putem određena je standardna eksponencijalna krivulja i jednadžba količine gRNK za IFN-γ u deseterostrukim serijskim razrjeđenjima naše pozitivne kontrole. Prema rezultatima pojave signala u deseterostrukim serijskim razrjeđenjima poznatog standarda u kojem je promijenjena reporter boja postupkom reverzne transkripcije s lančanom reakcijom polimeraze u stvarnom vremenu (real-time RT-PCR), matematičkim putem izračunata je prilagođena eksponencijalna krivulja te jednadžba koja je najbolje opisala dobivene vrijednosti.
Ključne riječi
interferon γ; newcastleska bolest; standardna krivulja; eksponencijalna jednadžba
Hrčak ID:
41285
URI
Datum izdavanja:
15.8.2009.
Posjeta: 1.637 *