Paediatria Croatica, Vol. 57 No. 1, 2013.
Pregledni rad
STANIČNA KULTURA HUMANIH MIOBLASTA - MODEL ZA ISTRAŽIVANJE METABOLIČKIH MIOPATIJA
Marija Zekušić
orcid.org/0000-0002-7068-0617
; Klinički zavod za laboratorijsku dijagnostiku Kliničkog bolničkog centra i Medicinskog fakulteta Sveučilišta u Zagrebu, Kišpatićeva 12, Zagreb
Željka Majić
orcid.org/0000-0002-9085-9155
; Medicinski fakultet Sveučilišta u Zagrebu, Šalata 3, Zagreb
Mario Ćuk
; Klinika za pedijatriju, Klinički bolnički centar Zagreb, Kišpatićeva 12, Zagreb
Klara Dubravčić
; Klinički zavod za laboratorijsku dijagnostiku Kliničkog bolničkog centra i Medicinskog fakulteta Sveučilišta u Zagrebu, Kišpatićeva 12, Zagreb
Karmen Bilić
; Klinički zavod za laboratorijsku dijagnostiku Kliničkog bolničkog centra i Medicinskog fakulteta Sveučilišta u Zagrebu, Kišpatićeva 12, Zagreb
Ana Škaričić
; Klinički zavod za laboratorijsku dijagnostiku Kliničkog bolničkog centra i Medicinskog fakulteta Sveučilišta u Zagrebu, Kišpatićeva 12, Zagreb
Ksenija Fumić
orcid.org/0000-0002-4127-7132
; Klinički zavod za laboratorijsku dijagnostiku Kliničkog bolničkog centra i Medicinskog fakulteta Sveučilišta u Zagrebu, Kišpatićeva 12, Zagreb
Ivo Barić
; Klinika za pedijatriju, Klinički bolnički centar Zagreb, Kišpatićeva 12, Zagreb
Sažetak
Nedostatak S-adenozilhomocistein hidrolaze (SAHH; EC 1.1.3.3.) dokazan je dosad u devetero bolesnika. Iako je klinička slika varijabilna, svi bolesnici koji boluju od ove multisistemske bolesti od rođenja imaju miopatiju. Budući da je nejasno zašto je baš mišićno tkivo najviše pogođeno kod bolesnika s nedostatkom SAHH-a, od iznimne je važnosti uspostava kulture mioblasta kao modela za daljnje proučavanje patogeneze ove bolesti na razini metabolita, proteina i gena. Uz pomoć enzimske digestije mioblasti su izdvojeni iz bioptata skeletnog mišića te su uzgajani u sterilnim uvjetima u mediju s faktorima rasta. Pošto su postigli konfluenciju od 70-80%, mioblasti su tripsinizacijom podijeljeni u subkulture te je uspostavljena kultura humanih mioblasta. Uporabom magnetskoga staničnog separatora mioblasti su odvojeni od fibroblasta i pohranjeni u tekući dušik. Čistoća pročišćenih mioblasta potvrđena je metodom protočne citometrije s površinskim biljezima CD 56+ i CD 45-. Pročišćeni mioblasti diferencirani su u miotube (nezrela mišićna vlakna). Prikazan je optimizirani postupak uzgoja i pohrane pročišćenih humanih mioblasta in vitro.
Ključne riječi
Deskriptori: MIOBLASTI; TEHNIKE STANIČNE KULTURE – metode; MIOPATIJE, STRUKTURNE, KONGENITALNE
Hrčak ID:
99166
URI
Datum izdavanja:
15.2.2013.
Posjeta: 1.240 *