Veterinarski arhiv, Vol. 86 No. 1, 2016.
Izvorni znanstveni članak
Brzo i vidljivo petljom posredovano izotermno umnažanje za dokazivanje Brucella spp. i njegova primjena u epidemiologiji bruceloze goveda.
Kumaragurubaran Karthik
orcid.org/0000-0002-9215-6306
; Division of Bacteriology and Mycology, Indian Veterinary Research Institute, Izatnagar, Bareilly, Uttar Pradesh, India
Rajesh Rathore
; Division of Bacteriology and Mycology, Indian Veterinary Research Institute, Izatnagar, Bareilly, Uttar Pradesh, India
Prasad Thomas
; Division of Bacteriology and Mycology, Indian Veterinary Research Institute, Izatnagar, Bareilly, Uttar Pradesh, India
Konasagara N. Viswas
; Division of Bacteriology and Mycology, Indian Veterinary Research Institute, Izatnagar, Bareilly, Uttar Pradesh, India
Rajesh K. Agarwal
; Division of Bacteriology and Mycology, Indian Veterinary Research Institute, Izatnagar, Bareilly, Uttar Pradesh, India
Valsala Rekha
; Division of Bacteriology and Mycology, Indian Veterinary Research Institute, Izatnagar, Bareilly, Uttar Pradesh, India
Ramesh V. Jagapur
; Division of Bacteriology and Mycology, Indian Veterinary Research Institute, Izatnagar, Bareilly, Uttar Pradesh, India
Kuldeep Dhama
orcid.org/0000-0001-7469-4752
; Division of Pathology, Indian Veterinary Research Institute, Izatnagar, Bareilly, Uttar Pradesh, India
Sažetak
Bruceloza je razorna bolest kad se u stadu pojavi u obliku pobačaja što iziskuje brzo postavljanje dijagnoze. Upotreba metode nazvane „petljom posredovano izotermno umnažanje“ (engl. loop mediated isothermal amplification, LAMP)“ omogućila je poboljšanje dijagnostike svojom jednostavnošću i brzinom, a prednost joj je da se može izvesti na postojanoj temperaturi pa se može primijeniti u terenskim uvjetima. U dosada razvijenim postupcima LAMP-a nije bio rabljen vizualni dokaz i nije se uspjelo skratiti vrijeme reakcije. U ovom istraživanju pokušalo se ukloniti te nedostatke razvitkom brzog postupka za vizualni dokaz Brucella spp., za što je potrebno samo 30 minuta i SYBR zeleno. LAMP test za dokaz gena omp25 pokazao se visoko osjetljivim i specifičnim za dokaz Brucella spp. Pretraga 438 terenskih uzoraka podrijetlom od goveda pokazala je da je LAMP osjetljiviji od raspoloživih testova PCR-a. Tim je testom dokazana prevalencija bruceloze od 14,7 % u različitim dijelovima Indije. Kao vrlo osjetljiv, specifičan i brz, LAMP test se može naširoko upotrijebiti u epidemiološkim istraživanjima bruceloze.
Ključne riječi
petljom posredovano izotermno umnažanje; brucele; početnice; omp25; SYBR zeleno
Hrčak ID:
153491
URI
Datum izdavanja:
15.2.2016.
Posjeta: 2.152 *