Veterinarski arhiv, Vol. 90 No. 5, 2020.
Izvorni znanstveni članak
https://doi.org/10.24099/vet.arhiv.0818
Ocjena brzog imunoenzimnog testa u otkrivanju onečišćenja mlijeka, vode i izmeta bakterijom Salmonella Typhimurium
Mohammad Khosravi
orcid.org/0000-0001-9510-3464
; Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, Shahid Chamran University of Ahvaz, Iran
Darioush Gharibi
; Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, Shahid Chamran University of Ahvaz, Iran
Najmeh Moradi
; Graduated Student, Faculty of Veterinary Medicine, Shahid Chamran University of Ahvaz, Iran
Masood Ghorbanpoor
; Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, Shahid Chamran University of Ahvaz, Iran
Sažetak
Serološke dijagnostičke metode znatno su primjenjivije u odnosu na standardne bakteriološke kulture. Cilj ovoga istraživanja bio je ocijeniti ekonomsku isplativost, brzinu, osjetljivost i jednostavnost testa u otkrivanju onečišćenosti mlijeka, vode i izmeta bakterijom Salmonella enteric subsp. enterica serovar Typhimurium (S. Typhimurium). Metoda se temelji na dodatku HRP-konjugiranih anti-Salmonella protutijela u uzorku, precipitaciji nastalih kompleksa centrifugom i procjeni peroksidazne aktivnosti supernatanta. Uzorci sirovog kravljeg mlijeka, vode i izmeta goveda inokulirani su sa sedam koncentracija bakterije S. Typhimurium. Primjenom optimiziranog testa zabilježeni su precizni podaci o volumenu i koncentraciji HRP-konjugiranih protutijela, bakterija, uzoraka, ionskih spojeva i vremenu reakcije. Test i priprema standardnih uzoraka pažljivo su optimizirani. Test je ponovljen najmanje deset puta i u svakom je ponavljanju određena najmanja razina detektibilnih bakterija te su rezultati uspoređeni s konvencionalnim pretragama kultura. Rezultati su pokazali da su u optimalnim uvjetima konjugirana anti-Salmonella protutijela reagirala s bakterijama u svakom tipu uzoraka. Razvijena metoda može u manje od 20 minuta otkriti barem 30 stanica/mL bakterije S. Typhimurium u vodi, 30 stanica/mL u PBS-u, 3×103 stanica/mL u mlijeku i 3×103 stanica/ mL u izmetu. Također, primjena ove metode mogla bi otkriti koncentraciju protutijela od 4,3 do 70 μg/mL. Metoda je brza, jeftina i jednostavna te može otkriti bakteriju S. Typhimurium u različitim uzorcima.
Ključne riječi
EIA; Salmonella Typhimurium; voda; mlijeko; izmet
Hrčak ID:
245823
URI
Datum izdavanja:
10.11.2020.
Posjeta: 916 *