Veterinarski arhiv, Vol. 91 No. 2, 2021.
Izvorni znanstveni članak
https://doi.org/10.24099/vet.arhiv.1305
MiRNA-let-7b smanjuje proliferacijsku aktivnost i razvoj folikularnih stanica putem ciljnog gena MAP3K1
Zhuandi Gong
; Hospital, Medicine College, Northwest Minzu University, Lanzhou, China
Yuhui Niu
; College of Life Science and Engineering, Northwest Minzu University, Lanzhou, China
Yuan Zhaofang
; College of Life Science and Engineering, Northwest Minzu University, Lanzhou, China
Juan Yang
; Biomedicine Research Center, Northwest Minzu University, Lanzhou, China
Suocheng Wei
; College of Life Science and Engineering, Northwest Minzu University, Lanzhou, China; Biomedicine Research Center, Northwest Minzu University, Lanzhou, China
Sažetak
Do danas nije definirano je li apoptoza folikularnih granuloza-stanica (FGCs) posredovana prekursorom miR-let- 7b putem gena MAP3K1. U ovom je istraživanju FGC transfeciran miR-let-7b imitatorom u različitim dozama (0, 40, 60, 80, 100 i 120 μM) i potom razvrstan u kontrolnu skupinu (CG), te u skupine označene kao MIM-1, MIM-2, MIM-3, MIM-4 i MIM-5. Razine ekspresije mRNA i proteina miR-let-7b i mitogenom-aktivirane proteinske kinase kinase kinase1 (MAP3K1) određene su uporabom RT-PCR-a i Western blot-a. Test luciferaze je primijenjen kako bi se potvrdio ciljni odnos između miR-let-7b i MAP3K1. Rezultati su pokazali da je proliferacijska aktivnost FGC-a u skupini MIM-4 bila znakovito manja nego u kontrolnoj skupini i MIM-1 skupini (P<0,05) što ide u prilog pretpostavci da miR-let-7b imitator može u FGCs smanjiti razinu ekpresije miR-let-7b. Najveće smanjenje utvrđeno je u skupini MIM-4. Razine MAP3K1 mRNAs i proteina u skupinama MIM-3 i MIM-4 bile su niže nego u kontrolnoj skupini (P<0,05; P<0,01). Transfekcija let-7b imitatorom znakovito je inhibirala aktivnost luciferaze (P<0,05) u usporedbi s kontrolnom skupinom. Zaključno, miR-let-7b može smanjiti opstojnost stanice i ubrzati apoptozu ovčjih FGC-a. Veće doze miR-let-7b mimic (80 μM i 100 μM) mogu znakovito smanjiti ekspresiju miR-let-7b mRNAs, MAP3K1 mRNAs i proteina u ovčjih FGC-a. MiR-let-7b putem inhibirajućeg gena MAP3K1 doprinosi apoptozi folikularnih granuloza-stanica (FGCs).
Ključne riječi
miRNA-let-7b; folikularne granuloza-stanice; MAP3K1; protein; ekspresija
Hrčak ID:
258462
URI
Datum izdavanja:
8.6.2021.
Posjeta: 1.074 *