Veterinarski arhiv, Vol. 91 No. 5, 2021.
Izvorni znanstveni članak
https://doi.org/10.24099/vet.arhiv.1047
Uspostava sendvič ELISE testa za goveđi plazma PON-1 i njegova prediktivna vrijednost za masnu jetru u mliječnih krava
Chang Zhao
; College of Animal Science and Technology, Anhui Agricultural University, Hefei, PR China
Yunlong Bai
; College of Animal Science and Veterinary Medicine, Heilongjiang Bayi Agricultural University, Daqing, PR China
Dong Wang
; Heilongjiang Provincial Key Laboratory of Prevention and Control of Bovine Diseases, College of Animal
Cheng Xia
; College of Animal Science and Veterinary Medicine, Heilongjiang Bayi Agricultural University, Daqing, PR China
Sažetak
Cilj ovog rada bio je unaprijediti kliničku dijagnostiku masne jetre (FL) u mliječnih krava upotrebom enzima paraoksonaze-1 (PON-1) kao indeksa za otkrivanje bolesti. Primijenjena je metoda prokariotske ekspresije kako bi se proizveo rekombinantni goveđi protein PON-1. Miševi su imunizirani ovim proteinom kako bi porizveli stanice hibridoma sa stabilnim izlučivanjem anti-PON-1. Stanice su injektirane u peritonealnu šupljinu miševa te je ascites pročišćen kako bi proizveo goveđa monoklonska protutijela PON-1. Tim su antigenom imunizirani kunići te je dobiveno poliklonsko antitijelo na goveđi PON-1. Upotrebom monoklonskih i poliklonskih antitijela uspostavljen je sendvič ELISA test dva sloja antitijela za plazmatski PON-1. Uzorci plazme prikupljeni su iz zdravih krava (n = 13) i krava s masnom jetrom (n = 13), dok su razine plazmatskog PON-1 detektirane upotrebom PON-1 ELISA. Analizom ROC krivulje analizirane su korelacije između razina PON-1 i FL-a. Rezultati pokazuju da je idealna radna koncentracija monoklonskih protutijela bila 0,8 mg/mL, a kvantitativno ograničenje detekcije 90 ng/mL. Razine plazmatskog PON-1 bile su znakovito niže u krava s masnom jetrom u usporedbi sa zdravim životinjama. Zaključeno je da je PON-1 dobiven ELISA-om prediktor rizičnih čimbenika za masnu jetru u krava. Plazmatske razine PON-1 mogu poslužiti kao rani pokazatelj masne jetre, a kao upozoravajući indeks pokazala se koncentracija od 61,87 nmol/L.
Ključne riječi
klinička primjena; ELISA; masna jetra; PON-1; ROC
Hrčak ID:
271609
URI
Datum izdavanja:
12.12.2021.
Posjeta: 516 *