Original scientific paper
https://doi.org/10.24141/1/6/1/1
Usporedba dva komercijalna fiksativa pri upotrebi u rutinskim histološkim analizama
Ljerka Armano
orcid.org/0000-0002-0267-3167
; University Clinical Hospital Center
Romana Gračan
orcid.org/0000-0002-7680-1993
; University of Zagreb, Faculty of Science, Department of Biology, Zagreb, Croatia
Abstract
Fiksiranje tkiva važan je korak u histološkoj obradi tkiva za izradu trajnih mikroskopskih preparata. Svrha fiksacije je očuvanje stanica i međustaničnih struktura kako bi što više nalikovali živom materijalu. U ovom istraživanju analizirali smo morfološke značajke unutrašnjih organa potočne pastrve (Salmo trutta L.) fiksirani s dva različita fiksativa. 10% neutralni puferirani formaldehid (PNF) koji daje kvalitetne histološke uzorke, ali je toksičan i kancerogen te zamjenskog fiksativa FineFix-a (FF) smanjene toksičnosti baziranog na etanolu. Kako bi usporedili učinak dva istraživana fiksativa, tkiva su nakon fiksacije uklopljena u paraplast, izrezana i obojena rutinskomn histološkom hemalaun eozinskom (HE) tehnikomte histokemijskom metodom bojenja perjodne kiseline i Schiffovog reagensa te alcijanskog modrila. Uzorci tkiva probavnog, dišnog i cirkulacijskog sustava potočne pastrvepokazalisu da je PNF i dalje najbolji izbor pri standardnoj fiksaciji za histološke i histokemijske analize. Kao najveća razlika između dva upotrebljena fiksativa ističe se kvaliteta fiksacije vezivnog tkiva u proučavanim organima, koja je bolja u tkivima fiksiranim s PNF, u usporedbi s FF, dok se FF istaknuo kao bolji fiksativ u HE bojenju preparata probavnog sustava. Ukoliko će se i dalje upotrebljavati PNF, određena osjetljiva tkiva poput probavnih organa mogu zahtijevati modificiranje standardnih postupaka bojenja, a naročito HE metode, kako bi se osigurao bolji afinitet tkiva za boju, a time i bolje prepoznavanje morfoloških struktura u tkivu, dok se potraga za zamjenskim, jednako kvalitetnim, fiksativom bez formalina i dalje nastavlja.
Keywords
fiksativi; formalin; formaldehid; FineFIX; histologija
Hrčak ID:
234999
URI
Publication date:
4.3.2020.
Visits: 2.844 *