Original scientific paper

https://doi.org/10.24099/vet.arhiv.1328

Induciranje pluripotentnih matičnih stanica upotrebom mRNA: učinak valproične kiseline, 5-azacitidina i askorbinske kiseline

Mahmoud F. Ahmed orcid.org/0000-0002-4654-5909 ; Key Laboratory of Animal Breeding, reproduction and molecular design for Jiangsu Province, College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, Yangzhou, China / Department of Surgery, Anesthesiology and Radiology, Faculty of Veterinary Medicine, Suez Canal University, Ismailia, Egypt
Ahmed K. El-Sayed ; Key Laboratory of Animal Breeding, reproduction and molecular design for Jiangsu Province, College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, Yangzhou, China / Department of Anatomy and Embryology, Faculty of Veterinary Medicine, Suez Canal University, Ismailia, Egypt
Eman A. Ahmed ; Department of Pharmacology, Faculty of Veterinary Medicine, Suez Canal University, Ismailia, Egypt
Yani Zhang ; Key Laboratory of Animal Breeding, reproduction and molecular design for Jiangsu Province, College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, Yangzhou, China
Bichun Li ; Key Laboratory of Animal Breeding, reproduction and molecular design for Jiangsu Province, College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, Yangzhou, China

Abstract

Ubrzani razvoj u područjima tkivnog inženjerstva i regenerativne medicine, potaknuo je tehnologiju pluripotentnih
matičnih stanica (iPSCs) koja zajedno s genskom terapijom predstavlja obečavajući izvor matičnih odnosno
transplantacijskih stanica. U ovom su radu, za vrijeme stvaranja mišjih iPSC-a upotrebom mRNA Yamanaka faktora
od mišjih embrionalnih fibroblasta (MEF), istraženi učinci različitih modulatora: malih molekula kao antioksidansa,
askorbinske kiseline (ASA), inhibitora histonske deacetilaze (HDACi), valproične kiseline (VPA), inhibitora DNA
metiltransferaze (DNMTi) i 5-azacitidina (5-AzaC). Ovi su modulatori odabrani zbog njihova dobro poznatog učinka
na epigenetski status i modifikaciju kromatina za vrijeme ranog reprogramiranja. Stvaranje iPSC-a postignuto je
upotrebom sintetiziranih mRNA Yamanaka faktora Oct4, Sox2, c-Myc i Klf4 (OSCK). Istražene su i morfološke
promjene i razina ekspresije markera pluripotencije. 5-AzaC s koncentracijom od 1 μM imao je mali toksičan učinak
na stanice, utječući na proliferaciju i njihov rast. Nasuprot tome, upotreba VPA-a ili ASA-e dovela je do dvostrukog
povećanja broja iPSC kolonija. iPSC kultura s dodatkom VPA-a ili ASA-e pokazala je visoku ekspresiju testiranih
markera pluripotencije, sa znakovitim višom razinom u odnosu na stanice kojima je dodan 5-AzaC. Ovi rezultati
rasvjetljuju ulogu ASA-e, VPA-a i 5-AzaC-a za vrijeme stvaranja mišjih iPSC-a primjenom strategije reprogramiranja
mRNA.

Keywords

iPSCs; 5-azacitidin; valproična kiselina; askorbinska kiselina; epigenetika

Hrčak ID:

274814

URI

https://hrcak.srce.hr/274814

Publication date:

24.3.2022.

Article data in other languages: english

Visits: 919 *