Original scientific paper

https://doi.org/10.24099/vet.arhiv.2580

Kisspeptin-10 modulira izlučivanje hormona i proliferaciju folikularnih granuloza-stanica povećavajući izražaj gena kiss-1r

Suocheng Wei ; College of Life Science and Engineering, Northwest Minzu University, Lanzhou, China; Biomedical Research Center, Northwest Minzu University, Lanzhou, China *
Enyu Gao ; College of Life Science and Engineering, Northwest Minzu University, Lanzhou, China
Linglong Xu ; College of Life Science and Engineering, Northwest Minzu University, Lanzhou, China
Mengyuan Pei ; College of Life Science and Engineering, Northwest Minzu University, Lanzhou, China; Biomedical Research Center, Northwest Minzu University, Lanzhou, China
Zhaofang Yuan ; College of Life Science and Engineering, Northwest Minzu University, Lanzhou, China

* Corresponding author.

Abstract

Cilj istraživanja bio je odrediti supcelularni smještaj proteina KISS-1 i istražiti učinak kispeptina 10 (KP-10) na umnažanje, održivost i izlučivanje hormona folikularnih granuloza-stanica (FGC). Također, istraženi su i molekularni mehanizmi koji prate navedene procese. FGC-e su kultivirane in vitro u mediju DMEM obogaćenom različitim dozama KP-10 (0, 10, 100 i 1000 nmol/L) te su prema tome razvrstani u kontrolnu skupinu (CG), pokusnu skupinu 1 (EP-1), pokusnu skupinu 2 (EP-2) i pokusnu skupinu 3 (EP-3). Supcelularni smještaj proteina FSHR i KISS-1 u FGC-ama analiziran je imunofluorescencijskim testom. Upotrijebljen je set za brojenje stanica 8 (CCK8), PCR u stvarnom vremenu (qPCR) i western blotting kako bi se ustanovila proliferacijska aktivnost i ekspresija gena i proteina u FGCama. ELISA kompleti primijenjeni su za mjerenje sadržaja estrogena (E2) i progesterona (P4). Imunofluorescencijski je test pokazao da je protein KISS-1 pozitivno eksprimiran u FGC-ama ovaca i većinom se izlučuje u citoplazmu. Nakon 48 sati i 72 sata tretmana s KP-10 održivost FGC-a u skupinama EP-2 i EP-3 znakovito je poboljšana u odnosu na kontrolnu skupinu (P<0,05 odnosno P<0,01). Sadržaj estrogena (E2) i progesterona (P4) u skupini EP-2 povećan je u usporedbi s kontrolnom skupinom (P<0,01). Osim toga, razine izražaja gena Kiss-1R, StAR, 3β-HSD i CYP11 mRNA u skupini EP-2 znatno su povećane u usporedbi s kontrolnom skupinom (P<0,05 odnosno P<0,01) s porastom od 65,9% za Kiss-1R, 30,7% za StAR, 73,4% za 3β-HSD i 71,4% za CYP11. Zaključeno je da su proteini KISS-1 bili smješteni većinom u citoplazmi FGC-a. KP-10 može povećati održivost FGC-a i izlučivanje progesterona i estrogena, što se može postići povećanom izražajnošću gena Kiss-1R, StAR, 3-β-HSD i CYP11. KP-10 znakovito je povećao razine mRNA i proteina u Bcl-2 i PI3K (P<0,01) te smanjio izražajnost mRNA i razine proteina u Bcl-2 i PI3K (P<0,05). Navedeni rezultati pružaju dobru osnovu za daljnja istraživanja poboljšanja reprodukcije životinja.

Keywords

kispeptin; folikularne granuloza-stanice; estrogen; progesteron; proliferacija

Hrčak ID:

326152

URI

https://hrcak.srce.hr/326152

Publication date:

1.1.2025.

Article data in other languages: english

Visits: 0 *