Veterinary Archives, Vol. 79 No. 6, 2009.
Original scientific paper
Ekspresija i pročišćavanje glavnoga proteina (OmpH) bakterije Pasteurella multocida P52 proizvedenoga u bakteriji Escherichia coli.
Rashmi Singh
; Department of Veterinary Microbiology, College of Veterinary and Animal Sciences, Govind Ballabh Pant University of Agriculture and Technology, Pantnagar, Uttarakhand, India
Praveen Kumar Gupta
; Division of Veterinary Biotechnology, Indian Veterinary Research Institute, Izatnagar, India
Velagapudi Durga Prasad Rao
; Department of Veterinary Microbiology, College of Veterinary and Animal Sciences, Govind Ballabh Pant University of Agriculture and Technology, Pantnagar, Uttarakhand, India
Abstract
Porin H (OmpH) je glavni protein stanične stijenke bakterije Pasteurella multocida. Gen ompH, koji kodira njegovu tvorbu, isključujući područje za tvorbu signalnog peptida, bio je umnožen lančanom reakcijom polimerazom i kloniran u prokariotskom vektoru pQE32. Rekombinantni OmpH bio je izražen kao fuzijski protein sa 6-His tag na N-kraju u stanicama E. coli M15 transformiranima rekombinantnim plazmidom pQE32- ompH. Proizveden protein bio je pročišćen iz E. coli i identificiran SDS-PAGE-om i western blotom. Izdvojeni fuzijski rekombinantni protein imao je molekularnu masu oko 37 kDa. Identitet proizvedenog rekombinantnog proteina bio je povrđen western blot analizom uporabom protutijela za RGS-His i antiseruma za lizat cjelovite stanice P. multocida.
Keywords
hemoragijska septikemija; Pasteurella multocida; protein stanične stijenke; rekombinantni protein
Hrčak ID:
53087
URI
Publication date:
18.12.2009.
Visits: 1.852 *