Original scientific paper
https://doi.org/10.17113/ftb.55.02.17.4896
Biokemijska karakterizacija rekombinantne ksilanaze iz bakterije Bacillus tequilensis BT21 i njezina primjena u proizvodnji ksilobioze iz poljoprivrednih otpadaka
Rakhee Khandeparker
; National Institute of Oceanography, CSIR, 403 004 Dona Paula, Goa, India
Pankaj Parab
; National Institute of Oceanography, CSIR, 403 004 Dona Paula, Goa, India
Ujwala Amberkar
; National Institute of Oceanography, CSIR, 403 004 Dona Paula, Goa, India
Abstract
Utvrđeno je da soj bakterije Bacillus tequilensis BT21, izoliran iz morskog sedimenta, može proizvesti izvanstaničnu ksilanazu. Gen xynBT21 za kodiranje ksilanaze kloniran je i eksprimiran u bakteriji Escherichia coli, gdje je kodirao protein molekularne mase od 23,3 kDa, koji sadržava 213 aminokiselinskih ostataka. Optimalna aktivnost pročišćene rekombinantne ksilanaze postignuta je pri temperaturi od 60 °C i pH=6. Enzim je bio izuzetno stabilan pri alkalnim pH vrijednostima. Pri pH=7 aktivnost mu je bila 100 % tijekom 24 sata, dok se tijekom inkubacije pri pH=8 i 9 aktivnost enzima povećala. Ksilanaza iz B. tequilensis imala je alkalnu pI vrijednost od 9,4; a pripada obitelji glikozilnih hidrolaza 11. Ispitano je djelovanje ksilanaze XynBT21 na ksilan iz bukve i ksilooligosaharide. Njihovom hidrolizom dobivena je pretežno ksilobioza (X2) uz manju količinu ksiloze (X1), zbog čega je zaključeno da je XynBT21 vjerojatno endoksilanaza. Enzimskom hidrolizom pšeničnih mekinja potvrđeno je da ksilanaza može proizvesti ksilobiozu na toj podlozi. Ksilooligosaharidi, osobito ksilobioza, imaju snažna bifidogena svojstva, pa se sve češće primjenjuju kao prebiotici. Ovo je prvi rad koji opisuje primjenu nove ksilanaze iz morske bakterije B. tequilensis BT21 za oslobađanje ksilobioze iz pšeničnih mekinja.
Keywords
enzim; ksilanaza; alkalna pI-vrijednost; karakterizacija; Bacillus tequilensis; ksilobioza
Hrčak ID:
183063
URI
Publication date:
14.6.2017.
Visits: 1.720 *