Izvorni znanstveni članak
https://doi.org/10.15255/KUI.2021.075
Učinci strukturnih promjena hidrolaze žučne soli na biokatalitičku učinkovitost i energiju aktivacije pri radnim uvjetima pH i temperature
Yakup Ermurat
; Engineering Faculty, Department of Chemical Engineering, Bolu Abant Izzet Baysal University, Bolu 14 280, Turska
Mehmet Öztürk
; Science and Literature Faculty, Department of Biology, Bolu Abant Izzet Baysal University, Bolu 14 280, Turska
Cansu Önal
; Science and Literature Faculty, Department of Biology, Bolu Abant Izzet Baysal University, Bolu 14 280, Turska
Zekiye Kılıçsaymaz
; Science and Literature Faculty, Department of Biology, Bolu Abant Izzet Baysal University, Bolu 14 280, Turska
Sažetak
Mikrobne hidrolaze žučnih soli (BSH) kataliziraju hidrolizu soli glicina i taurina u tankom crijevu ljudi. Aminokiseline odgovorne za biokatalitičku aktivnost ili specifičnost supstrata u BSH molekulama modificirane su da bi se odredio utjecaj strukturnih promjena BSH molekula na biokatalitičku učinkovitost (kcat/Km) i energiju aktivacije (Ea) reakcija biokonverzije. Pročišćen prirodni enzim pCON2, upotrijebljen kao kontrola, a mutantni enzimi (F18L i Y24L) reagirali su sa šest čistih supstrata konjugiranih žučnih soli pri radnim uvjetima pH i temperature. Eksperimenti provedeni pri različitim pH vrijednostima primijenjeni su u procjeni kcat/Km vrijednosti biokatalitičkih reakcija, dok su eksperimenti provedeni pri različitim temperaturama primijenjeni u aproksimaciji njihovih Ea vrijednosti. Iznos kcat/Km bio je najveći kod mutantnih enzima (Y24L), a najniži kod kontrole (pCON2), što ukazuje da su strukturne modifikacije u BSH molekulama povezane s većom učinkovitosti. Preinake kod mutantnih enzima F18L i Y24L rezultirale su smanjenjem vrijednosti kcat/Km te povećanjem procijenjene Ea vrijednosti reakcija hidrolize.
Ključne riječi
žučne soli; prirodna hidrolaza; preinačena hidrolaza; biokatalitička učinkovitost; energija aktivacije
Hrčak ID:
280678
URI
Datum izdavanja:
18.7.2022.
Posjeta: 457 *