Original scientific paper
Usporedba rekombinantne ekspresije dviju fitaza u E. coli i ispitivanje njihove topljivosti
Ushasree Mrudula Vasudevan
; Biotechnology Division, National Institute for Interdisciplinary Science and Technology (NIIST), CSIR, 695 019 Trivandrum, Kerala, India
Sumayya Husaiba Beevi Salim
; Biotechnology Division, National Institute for Interdisciplinary Science and Technology (NIIST), CSIR, 695 019 Trivandrum, Kerala, India
Ashok Pandey
orcid.org/0000-0003-1626-3529
; Biotechnology Division, National Institute for Interdisciplinary Science and Technology (NIIST), CSIR, 695 019 Trivandrum, Kerala, India
Abstract
Mikrobne fitaze, osobito iz plijesni i bakterija, imaju vrlo važnu ulogu u prehrambenoj industriji kao aditivi i dodaci prehrani monogastričnih životinja. Za industrijsku je proizvodnju poželjno pronaći učinkoviti postupak ekspresije gena za dobivanje rekombinantnih fitaza. U radu je prikazan postupak kloniranja i ekspresije gena za proizvodnju fitaza iz plijesni vrste Aspergillus i bakterije Escherichia coli, s pomoću pažljivo odabrane kombinacije domaćina, vektora i induktora. Iako su pritom nastali netopljivi agregati (tzv. inkluzije), rekombinantni gen E. coli appA uspješno je i bez većih troškova izražen u periplazmi stanica BL21plysS, uz koncentraciju induktora od 0,01 mM, tijekom 4 sata rasta. Enzim je pročišćen u tri uzastopna koraka, te su ispitane njegove značajke.
Keywords
A. niger fitaza; koncentracija induktora; rekombinantni gen appA
Hrčak ID:
71056
URI
Publication date:
10.8.2011.
Visits: 1.808 *