Original scientific paper

https://doi.org/10.2478/aiht-2019-70-3352

Optimizacija metode plinske kromatografije-spektrometrije masa za istovremeno određivanje tetrahidrokanabinola i njegovih metabolita u urinu štakora

Nino Fuchs ; University Hospital Centre Zagreb, Croatia
Alena Miljanić ; Department of Biotechnology, University of Rijeka, Croatia
Anja Katić ; Institute for Medical Research and Occupational Health, Zagreb, Croatia
Nataša Brajenović ; Institute for Medical Research and Occupational Health, Zagreb, Croatia
Vedran Micek ; Institute for Medical Research and Occupational Health, Zagreb, Croatia
Radovan Fuchs ; Institute for Medical Research and Occupational Health, Zagreb, Croatia
Irena Brčić Karačonji orcid.org/0000-0002-1151-8839 ; Institute for Medical Research and Occupational Health, Zagreb, Croatia

Abstract

S ciljem procjene učinka irinotekana (IRI) na eliminaciju delta-9-tetrahidrokanabinola (THC) mokraćom u eksperimentalnom modelu štakora, razvili smo analitičku metodu za određivanje masene koncentracije THC-a i njegovih metabolite [11-hidroksi-delta-9-tetrahidrokanabinola (THC-OH) i 11-nor-9-karboksi-delta-9-tetrahidrokanabinola (THC-COOH)] u mokraći štakora tretiranih samo THC-om i tretiranih istodobno s THC-om i IRI-jem. U tu svrhu optimizirani su uvjeti hidrolize i ekstrakcije na čvrstom nosaču za ispitivane analite i razvijena je metoda plinske kromatografije-spektrometrije masa (GC-MS) kako bi se kvantificirala sva tri analita u mokraći štakora. Najučinkovitija metoda hidrolize za konjugate THC, THC-OH i THC-COOH bila je tandemska hidroliza enzimom β-glukuronidazom iz Escherichia coli na 50 ° C u trajanju od 2 sata koju je slijedila alkalna hidroliza. Predložena metoda je primijenjena za određivanje masene koncentracije analita u 24-satnom urinu štakora. THC nije detektiran ni u jednom uzorku, THC-OH je kvantificiran u 50 % uzoraka, a THC-COOH u svim uzorcima. Uočeno je povećano izlučivanje THC-COOH u mokraći štakora koji su tretirani kombinacijom THC-a i IRI-ja u usporedbi sa štakorima tretiranim samo THC-om. Opisana metoda bila je pogodna za određivanje masene koncentracije metabolita THC-a u mokraći štakora zbog njene osjetljivosti (granice detekcije: 0,8-1,0 μg/L), točnosti (> 96%) i preciznosti (RSD <6%).

Keywords

analitička validacija; GC-MS, irinotekan; hidroliza; kanabis

Hrčak ID:

229441

URI

https://hrcak.srce.hr/229441

Publication date:

6.12.2019.

Article data in other languages: english

Visits: 2.259 *