Izvorni znanstveni članak
https://doi.org/10.2478/aiht-2019-70-3352
Optimizacija metode plinske kromatografije-spektrometrije masa za istovremeno određivanje tetrahidrokanabinola i njegovih metabolita u urinu štakora
Nino Fuchs
; University Hospital Centre Zagreb, Croatia
Alena Miljanić
; Department of Biotechnology, University of Rijeka, Croatia
Anja Katić
; Institute for Medical Research and Occupational Health, Zagreb, Croatia
Nataša Brajenović
; Institute for Medical Research and Occupational Health, Zagreb, Croatia
Vedran Micek
; Institute for Medical Research and Occupational Health, Zagreb, Croatia
Radovan Fuchs
; Institute for Medical Research and Occupational Health, Zagreb, Croatia
Irena Brčić Karačonji
orcid.org/0000-0002-1151-8839
; Institute for Medical Research and Occupational Health, Zagreb, Croatia
Sažetak
S ciljem procjene učinka irinotekana (IRI) na eliminaciju delta-9-tetrahidrokanabinola (THC) mokraćom u eksperimentalnom modelu štakora, razvili smo analitičku metodu za određivanje masene koncentracije THC-a i njegovih metabolite [11-hidroksi-delta-9-tetrahidrokanabinola (THC-OH) i 11-nor-9-karboksi-delta-9-tetrahidrokanabinola (THC-COOH)] u mokraći štakora tretiranih samo THC-om i tretiranih istodobno s THC-om i IRI-jem. U tu svrhu optimizirani su uvjeti hidrolize i ekstrakcije na čvrstom nosaču za ispitivane analite i razvijena je metoda plinske kromatografije-spektrometrije masa (GC-MS) kako bi se kvantificirala sva tri analita u mokraći štakora. Najučinkovitija metoda hidrolize za konjugate THC, THC-OH i THC-COOH bila je tandemska hidroliza enzimom β-glukuronidazom iz Escherichia coli na 50 ° C u trajanju od 2 sata koju je slijedila alkalna hidroliza. Predložena metoda je primijenjena za određivanje masene koncentracije analita u 24-satnom urinu štakora. THC nije detektiran ni u jednom uzorku, THC-OH je kvantificiran u 50 % uzoraka, a THC-COOH u svim uzorcima. Uočeno je povećano izlučivanje THC-COOH u mokraći štakora koji su tretirani kombinacijom THC-a i IRI-ja u usporedbi sa štakorima tretiranim samo THC-om. Opisana metoda bila je pogodna za određivanje masene koncentracije metabolita THC-a u mokraći štakora zbog njene osjetljivosti (granice detekcije: 0,8-1,0 μg/L), točnosti (> 96%) i preciznosti (RSD <6%).
Ključne riječi
analitička validacija; GC-MS, irinotekan; hidroliza; kanabis
Hrčak ID:
229441
URI
Datum izdavanja:
6.12.2019.
Posjeta: 1.710 *