Veterinarski arhiv, Vol. 73 No. 2, 2003.
Izvorni znanstveni članak
Dokaz američke serološke skupine orbivirusa upotrebom višestruke RT-PCR.
Imadeldin Aradaib
; Department of Medicine, Pharmacology and Toxicology, Faculty of Veterinary Medicine, University of Khartoum, Khartoum North, Sudan
Abdelrahim Karrar
; Department of Medicine, Pharmacology and Toxicology, Faculty of Veterinary Medicine, University of Khartoum, Khartoum North, Sudan
Mohammed Abdalla
; Department of Medicine, Pharmacology and Toxicology, Faculty of Veterinary Medicine, University of Khartoum, Khartoum North, Sudan
Bennie Osburn
; Department of Pathology, Microbiology and Immunology, School of Veterinary Medicine, University of California, Davis, USA
Sažetak
Rabljen je višestruki RT-PCR (lančana reakcija polimerazom uz prethodnu reverznu transkripciju) za dokazivanje i razlikovanje serološke skupine virusa bolesti plavog jezika (BPJ) i virus epizootske hemoragijske bolesti jelena (EHB) izdvojenih u SAD-u te uzgojenih na staničnoj kulturi. Određeni su parovi početnica za hibridizaciju na odsječak 6 genoma virusa EHB-2 te na odsječak 10 genoma virusa BPJ-10. Za RT-PCR korištena je PCR amplifikacija u jednoj epruveti u kojoj su početnice za virus EHB i virus BPJ istodobno upotrijebljene u višestrukom obliku. Pomoću početnica virusa EHB proizvedeno je 387 parova baza (pb) specifičnog proizvoda PCR iz uzoraka RNA serotipova 1 i 2 toga virusa prilagođenog na staničnu kulturu, ali ne i iz serotipova 2, 10, 11, 13 i 17 virusa BPJ ili iz ekstrakta ukupne nukleinske kiseline kontrolne stanične kulture bubrega hrčka (BHK). Početnice za virus BPJ dovele su do proizvoda od 251 para baza iz uzoraka RNA serotipova 2, 10, 11, 13 i 17 toga virusa, dok serotipovi 1 i 2 virusa EHB i ukupni ekstrakt nukleinske kiseline stanične kulture BHK-21 nisu doveli do specifičnog proizvoda od 251 para baza. Umnoženi proizvodi PCR za viruse EBH i BPJ mogli su se jednostavno identificirati na osnovi razlika u veličini na agaroznom gelu obojenom etidij-bromidom. Postupak višestruke RT-PCR pruža pomoćnu dijagnostičku metodu za brzo dokazivanje infekcija uzrokovanih virusima BPJ i EHB među prijemljivim preživačima.
Ključne riječi
orbivirusi; dijagnosticiranje; RT-PCR
Hrčak ID:
71158
URI
Datum izdavanja:
22.4.2003.
Posjeta: 875 *