Veterinarski arhiv, Vol. 88 No. 5, 2018.
Izvorni znanstveni članak
https://doi.org/10.24099/vet.arhiv.0145
Brzo otkrivanje uzročnika virusnog proljeva goveda u mlijeku iz spremnika pomoću kombinacije metoda umnožene rekombinazne polimeraze i test-traka za „lateral flow“ analizu
Peili Hou
; Key Laboratory of Animal Resistant Biology of Shandong, Ruminant Diseases Research Center, College of Life Sciences, Shandong Normal University, Jinan, China
Guimin Zhao
; Key Laboratory of Animal Resistant Biology of Shandong, Ruminant Diseases Research Center, College of Life Sciences, Shandong Normal University, Jinan, China
Hongmei Wang
; Key Laboratory of Animal Resistant Biology of Shandong, Ruminant Diseases Research Center, College of Life Sciences, Shandong Normal University, Jinan, China
Chengqiang He
; Key Laboratory of Animal Resistant Biology of Shandong, Ruminant Diseases Research Center, College of Life Sciences, Shandong Normal University, Jinan, China
Hongbin He
; Key Laboratory of Animal Resistant Biology of Shandong, Ruminant Diseases Research Center, College of Life Sciences, Shandong Normal University, Jinan, China
Sažetak
Uzročnik virusnog proljeva goveda (BVDV) jedan je od najčešćih i ekonomski važnih patogena preživača koji uzrokuje znatne financijske gubitke u stočarskoj industriji širom svijeta. Razvoj brzih i točnih dijagnostičkih metoda iznimno je važan za kontrolu i iskorjenjivanje zaraze BVDV-om. Cilj ovog istraživanja bio je razviti novu metodu za brzo otkrivanje BVDV-a baziranu na kombinaciji metoda umnožene rekombinazne polimeraze i test-traka za „lateral flow“ analizu. Oblikovane su početnice i probe za umnažanje rekombinazne polimeraze usmjerene na specifični konzervirani 5’-UTR u genomu BVDV-a. Umnažanje se moglo završiti pri konstantnoj temperaturi od 38 °C tijekom 15 minuta i produkt umnažanja je lako vizualiziran na jednostavnoj test-traci za „lateral flow“ analizu unutar 5 minuta. Test je ograničen na 20 kopija po reakciji, pri čemu nije bilo križne reaktivnosti s drugim goveđim zaraznim virusima kao što su infektivni rinotraheitis virusa goveda (IBRV), goveđi enterovirus (BEV), goveđi koronavirus (BcoV), virus goveđe parainfluence tipa 3 (BPIV-3), virus gljivične ephemeralne groznice (BEFV) i goveđi respiratorni sincicijski virus (BRSV). Učinkovitost kombinacije navedenih metoda istražena je i s obzirom na usporedbu osjetljivosti odnosno točnosti koja se dobiva uporabom RT-PCR metode. Od 284 skupna uzorka mlijeka iz spremnika, kombinacijom metoda umnožene rekombinazne polimeraze i test-traka za „lateral flow“ analizu utvrđen je 51 pozitivan uzorak, a RT-PCR 52 pozitivna uzorka. Stopa podudarnosti između navedenih metoda bila je 97,54 % (277/284).
Ključne riječi
uzročnik virusnog proljeva goveda (BVDV); umnažanje rekombinazne polimeraze; test-traka za „lateral flow“ analizu; mlijeko iz spremnika
Hrčak ID:
206845
URI
Datum izdavanja:
15.10.2018.
Posjeta: 1.135 *