Skoči na glavni sadržaj

Veterinarski arhiv, Vol. 90 No. 3, 2020.

Izvorni znanstveni članak

https://doi.org/10.24099/vet.arhiv.0803

Ekspresija i pročišćavanje površinskog lipoproteinskog antigena Lipl41 iz patogenih bakterija roda Leptospira

Narges Golab ; Department of Microbiology, Karaj Branch, Islamic Azad University, Karaj, Iran
Pejvak Khaki ; Department of Microbiology, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran
Naser Harzandi ; Department of Microbiology, Karaj Branch, Islamic Azad University, Karaj, Iran
Majid Esmaelizad ; Department of Biotechnology, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran
Majid Tebianian ; Department of Immunology, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran

Puni tekst: engleski pdf 8.256 Kb

str. 297-305

preuzimanja: 370

citiraj

Sažetak

Patogene vrste Leptospira uzrokuju zoonotsku bolest leptospirozu koja je raširena u cijelom svijetu. Cilj istraživanja bio je dokazati antigene koji potiču imunosni odgovor i mogu se primijeniti u dijagnostičkim kompletima ili za razvoj cjepiva. Vanjska proteinska membrana (OMPs) leptospira potencijalni je kandidat za tu svrhu, a gen Lipl41 je dobro očuvan među patogenim leptospirama. Ekspresija i pročišćavanje rekombinantnog proteina Lipl41 provedeno je u izolatima iz Irana. Uspoređene su sve prikupljene sekvencije proteina Lipl41 i analizirane bioinformatičkim alatom iz baze podataka NCBI. Kompletne sekvencije kodona rekombinantnog proteina Lipl41 u izolatima su optimizirane, zatim subklonirane u pET32a+ vektor i pretvorene u bakteriju Escherichia coli BL21 (DE3). Optimalna ekspresija rekombinantnog Lipl41 (47kDa) postignuta je post-indukcijski pomoću isopropyl β-d-1-thiogalactopyranoside (IPTG). Zatim je pročišćena denaturacijom što je uključilo primjenu serijskih koncentracija ureje. Rekombinantni protein je potvrđen metodom western blot. Istraživanje potvrđuje mogućnost ostvarenja dostatne količine i ekspresije pročišćenog Lip141 da se može upotrijebiti za razvoj dijagnostičkih kompleta i subjediničnih cjepiva.

Ključne riječi

rekombinirani protein Lipl41; ekspresija; pročišćavanje; patogena Leptospira

Hrčak ID:

241826

URI

https://hrcak.srce.hr/241826

Datum izdavanja:

22.7.2020.

Podaci na drugim jezicima: engleski

Posjeta: 1.363 *