Veterinarska stanica, Vol. 53 No. 1, 2022.
Izvorni znanstveni članak
https://doi.org/10.46419/vs.53.1.3
Molekularna diferencijacija izolata bolesti kvrgave kože na terenu i cjepnih sojeva virusa Capripox u Egiptu 2018.
Christine A. Mikhael
orcid.org/0000-0001-5374-8627
; Agriculture Research Center (ARC); Central Laboratory for Evaluation of Veterinary Biologics (CLEVB).El-Seka-Baida Street, Abbasia, Cairo, Egypt
Abdelhakim M. M. Ali
; General Organization of Veterinary Services, Cairo, Egypt
Sažetak
Virus bolesti kvrgave kože pripada rodu Capripox virusa porodice Poxviridae, koji pogađa stoku i uzrokuje bolest sa značajnim ekonomskih gubitcima, a koja se kontrolira cijepljenjem živim oslabljenim capripox cjepivima. Cilj studije bio je izolirati i identificirati soj virusa BKK na terenu tijekom 2018. godine. Prikupljene kvrge na koži u stoke klinički inficirane bolešću kvrgave kože (BKK) rabljene su za izoliranje virusa na korioalantoičnoj membrani (CAM) embrioniranog kokošjeg jaja (ECE) bez specifičnog patogena (SPF) i staničnoj kulturi bubrega goveda Madin Darby Bovine Kidney (MDBK stanična linija). Lančane reakcije polimerazom (PCR) usmjerene na ORF103 gen virusa Capripox (CaPV) primijenjene su na izolirani BKK virus i tri cjepna soja virusa Capripox (kenijski virus ovčjih boginja, Held virus kozjih boginja i Ismailia virus bolesti kvrgave kože). PCR amplikoni četiriju sojeva CaPV (jednog izoliranog i tri cjepna soja) rabljeni su za sekvenciranje i dobivanje pristupnog broja u banci gena te ilustriranje filogenetskog stabla u usporedbi s drugim referentnim virusima Capripox dobivenima iz banke gena. BKK virus izoliran iz prikupljenih
uzoraka kvrga na koži na embrioniranom kokošjem jaju pokazao je jasne tipične pustula lezije na korioalantoičnoj membrani, a na staničnim kulturama (MDBK stanična linija) pokazao je karakterističan citopatski učinak. Pozitivni uzorci izoliranog soja BKK identificirani su PCR-om za CaPV ORF103 gen koji je dao očekivane veličine amplikona od 570 bp te potvrđeni sekvenciranjem gena uz analizu putem BLAST-a i su dostavljeni banci gena pod pristupnim brojem MW 546997_LSD_Aziz_LSD. Dizajnirano je filogenetsko stablo i otkriveno je da je soj izolata virusa BKK na terenu imao postotke različitog identiteta koji su se kretali od 98,2-99,8 % s testiranim cjepnim sojevima virusa Capripox u Egiptu. Sekvenca aminokiselina pokazala je samo jednu posebnu aminokiselinu koja je pronađena u soju izolata s terena, ali ne u ostalim testiranim cjepnim sojevima. Maksimalna podudarnost (100%) nukleotidne sekvence izoliranog BKK soja bila je s dva soja zabilježena u banci gena (MK342935_LSD-CPD/Menofiya1/18) i (MN792930_LSD/AHRI/_Wadi Elgdid/18). Zaključeno je da je izolirani soj virusa BKK imao velike postotke identiteta (98,2-99,8 %) s testiranim cjepnim sojevima virusa Capripox u Egiptu. Da bi se postigao najpovezaniji i homologni cjepni soj, jer je genom BKK virusa velik preporučujemo nastavak programa rutinskog cijepljenja za BKK u Egiptu, često uništavanje populacije insekata i provedbu dodatnih genetskih studija na genomima soja BKK virusa i cjepnih sojeva virusa Capripox da bi se postigao najpovezaniji i homologni cjepni soj, jer je genom BKK virusa golem.
Ključne riječi
molekularna diferencijacija; filogenetska analiza; bolest kvrgave kože; virus Capripox; orf103 gen
Hrčak ID:
259060
URI
Datum izdavanja:
17.6.2021.
Posjeta: 1.055 *