Original scientific paper

https://doi.org/10.24099/vet.arhiv.1821

Analiza učestalosti goveđeg beta-kazeina tipa A1 i A2 u krava holštajnsko-frizijske pasmine PCR-om u stvarnom vremenu s fluorescentnim hibridizacijskim sondama

Sena Ardicli orcid.org/0000-0003-2758-5945 ; Bursa Uludag University, Faculty of Veterinary Medicine, Department of Genetics, 16059 Nilufer, Bursa, Turkey
Hale Samli ; Bursa Uludag University, Faculty of Veterinary Medicine, Department of Genetics, 16059 Nilufer, Bursa, Turkey
Faruk Balci ; Bursa Uludag University, Faculty of Veterinary Medicine, Department of Genetics, 16059 Nilufer, Bursa, Turkey

Abstract

Popularnost mlijeka s A2 tipom beta-kazeina sve je veća diljem svijeta što je popraćeno razvojem novih i pouzdanijih metoda za molekularne analize. Cilj je ovog istraživanja bila genotipizacija holštajnsko-frizijskih krava s obzirom na A1/A2 status primjenom PCR-a u stvarnom vremenu (RT-PCR) s posebno dizajniranim FRET hibridizacijskim sondama. DNA je dobivena iz uzoraka mlijeka 310 krava. RT-PCR-om analizirana je temperatura taljenja svakog amplikona te su ti podaci uz upotrebu sustava LightCycler 480 korišteni za iscrtavanje grafičkih prikaza. Senzorska sonda dizajnirana je tako da odgovara divljem tipu sekvencije u ciljnoj DNA. Vršne vrijednosti taljenja dobivene RTPCR-om bile su postojane razlučivosti za svaki genotip s obzirom na promjenu CCT→CAT. Rezultati su pokazali vrlo visoku učestalost alela A2 (68 %) i znakovitu učestalost heterozogotnih životinja (0,41). Genetska analiza u populaciji pokazala je srednje vrijednosti genetske varijabilnosti i bioraznolikosti. Proces usmjeravanja uzgoja prema životinjama s A2 tipom mlijeka složen je proces koji uključuje genetsko testiranje krava i teladi, procjenu stopa zamjene i konverziju heterozigota upotrebom A2-genotipiziranog sjemena bikova. U tom je smislu ključna brza i pouzdana metoda genotipizacije životinja koje proizvode mlijeko bez A1 tipa beta-kazeina. Ovo istraživanje pokazuje da se RT-PCR s posebno dizajniranim hibridizacijskim FRET sondama može preporučiti za A2 genotipizaciju goveda. Navedena metoda mogla bi biti korisna u daljnjim istraživanjima te u industriji i u uzgoju stada za proizvodnju mlijeka s A2 tipom beta-kazeina.

Keywords

goveda; A2 mlijeko; β-kazein; genetsko testiranje; FRET hibridizacijske sonde

Hrčak ID:

307404

URI

https://hrcak.srce.hr/307404

Publication date:

16.8.2023.

Article data in other languages: english

Visits: 770 *