Meeting abstract
Analiza koncentracije i čistoće dna-a iz brisa bukalne sluznice naspram suhe kapilarne krvi
Jana Krkalo
; Zdravstveno veleučilište Zagreb
Domagoj Caban
; Zdravstveno veleučilište Zagreb
Ivna Kocijan
; Zdravstveno veleučilište Zagreb
Ana Mojsović Ćuić
; Zdravstveno veleučilište Zagreb
Abstract
Izolacija DNA-a jedan je od ključnih metodoloških postupaka
u molekularnoj biologiji te nužan preduvjet za
molekularnu dijagnostiku nasljednih bolesti. U ovom
istraživanju analizirana je učinkovitost izolacije ljudskog
DNA-a iz dvaju različitih tipova bioloških uzoraka
– brisa bukalne sluznice i periferne kapilarne krvi prikupljene
na DBS karticama. Primarni cilj bio je utvrditi
koncentraciju i čistoću izoliranog DNA-a te ispitati utjecaj
uvjeta pohrane uzoraka bukalne sluznice (hladnjak i
sobna temperatura) na kvalitativne i kvantitativne parametre
dobivenih rezultata. Uzorkovanje periferne krvi i
bukalne sluznice provedeno je u laboratoriju Zdravstvenog
veleučilišta, pri čemu su korišteni vlastiti uzorci krvi
i brisovi bukalne sluznice. Kapilarna krv prikupljena je
ubodom lancete u jagodicu prsta, a potom aplicirana
na DBS karticu, a uzorkovanje bukalne sluznice provedeno
je jednokratnim sterilnim kolektorima trljanjem
unutarnje strane obraza. Izolacija DNA-a provedena je
uporabom komercijalnog kompleta Qiagen DNeasy Blood
& Tissue, a koncentracija i čistoća određene su spektrofotometrijski
s pomoću uređaja NanoDrop. Dobiveni
rezultati ukazali su na znatno veću koncentraciju (prosječno
45,65 ng/μL) i višu razinu čistoće DNA-a (A260/
A280 ≈ 1,87) u uzorcima bukalne sluznice u odnosu na
kapilarnu krv prikupljenu na FTA karticama (prosječna
koncentracija 7,8 ng/μL, A260/A280 ≈ 0,90). Utvrđene su
značajne razlike u koncentraciji i čistoći DNA-a između
analiziranih tipova uzoraka, dok varijacije u uvjetima
pohrane brisova bukalne sluznice nisu pokazale značajan
učinak. Na temelju dobivenih rezultata može se zaključiti
da bris bukalne sluznice predstavlja pouzdanu,
neinvazivnu i tehnički jednostavnu metodu prikupljanja
uzoraka pogodnih za izolaciju DNA-a visoke kvalitete,
što ga čini prikladnim za primjenu u različitim područjima
molekularne dijagnostike.
Keywords
izolacija DNA-a, bukalni bris, suha kapilarna krv
Hrčak ID:
350663
URI
Publication date:
21.2.2026.
Visits: 0 *