Original scientific paper

Primjena monoklonskih protutijela u razvoju imunoenzimnog testa (ELISA) za dijagnosticiranje tuberkuloze goveda.

Kanat Tolebaevich Shenzhanov ; Kazakh Agrarian University, Astana, Kazakhstan
Aitbay Kabykeshovich Bulashev ; Kazakh Agrarian University, Astana, Kazakhstan
Gulnar Amanzholovna Bakirova ; Kazakh Agrarian University, Astana, Kazakhstan

Abstract

Polučena su tri stabilna soja hibridomskih stanica (2H10, 3A8, 1B6) za proizvodnju monoklonskih protutijela (Mab) koja su reagirala s proteinskim pročišćenim derivatom (PPD) bakterije Mycobacterium bovis. Proizvedena monoklonska protutijela nisu se mogla vezati na PPD vrste M. avium i cijele stanice vrsta M. bovis, M. kansasii i M. scrofulaceum kao ni za njihove topive i ultrazvukom obrađene antigene. PPD vrste M. bovis bio je vezan na čvrstu fazu preko monoklonskih protutijela koja su usmjerena za njen protein molekulske mase 66 kDa. Dijagnostička učinkovitost sendvič imunoenzimnog testa bila je uspoređena s kožnim testom. Krvni uzorci bili su uzeti od 849 krava koje su potjecale iz tuberkulozom zahvaćenih i nezahvaćenih uzgajališta. Devedeset krava (10,6%) reagiralo je na PPD M. bovis, ali su među njima samo 22 (2,6%) bile pozitivne imunoenzimnim testom. Prosječni titar specifičnih protutijela za M. bovis ustanovljen u uzorcima seruma imunoenzimnim testom bio je 1:920 do 1:6400. Dijagnostička vrijednost imunoenzimnog i kožnog testa bila je određena autopsijom 12 krava. Specifična protutijela za M. bovis u visokom titru ustanovljena su u krvnom serumu devet krava koje su bile pozitivne na kožni test. Tri krave su bile pozitivne kožnim testom, ali u njihovim krvnim uzorcima nisu ustanovljena specifična protutijela. Rezultati razudbe pokazali su da je u svih krava s pozitivnim ELISA i kožnim testom, patološki nalaz na plućima i limfnim čvorovima bio specifičan za tuberkulozu. Na unutarnjim organima krava koje su reagirale samo na kožni test nije bilo nikakvih promjena. Rezultati istraživanja potvrđuju visoku specifičnost i učinkovitost sendvič imunoenzimnog testa temeljenog na monoklonskim protutijelima. Test se može rabiti za otkrivanje i izdvajanju tuberkuloznih životinja kao i za prikaz procjene aktualnog epizootiološkog stanja.

Keywords

Mycobacterium bovis; monoklonska protutijela; ELISA; kožni test; krave

Hrčak ID:

71200

URI

https://hrcak.srce.hr/71200

Publication date:

22.4.2003.

Article data in other languages: english

Visits: 1.523 *