Original scientific paper

CIJEPLJENJE HIBRIDNOG LUBINA: RAST, IMUNOLOŠKA REAKCIJA I EKSPRESIJA GENA

Paul Cotter ; Department of Fisheries & Wildlife Sciences, 100 Cheatham Hall, Blacksburg VA 24060-0321, USA
Ewen McLean ; Marine and Environmental Sciences, at the University of Trinidad and Tobago, Marine and Environmental Sciences, Phase III, Maritime Campus, University of Trinidad and Tobago, Second Avenue, Northwestern Main Road, Chaguaramas, Trinidad W.I
Steven R. Craig ; Director of Nutrition Research at Virginia Cobia Farms, Virginia Cobia Farms, LLC, 108 Battleground Avenue, Saltville, VA 24370, USA
Johanna Craig ; Founder and Principal of GATACA LLC, GATACA, LLC, 180 Orchard Hill Lane, Newport, VA 24128, USA
Mark Westerman ; President and CEO of Intrinsic LifeSciences LLC, Intrinsic Life Sciences, 505 Coast Boulevard South, La Jolla, CA 92037, USA

Abstract

Hibridni lubini (42,6+4,9 g mokre težine; 139,3+6,1 mm dužine) su nasumce stavljeni u jedan od 6 spremnika (n=6 spremnik-1) s recirkulirajućim sustavom za održavanje života (RLSS) izrađenim po mjeri. Kvaliteta vode je bila sljedeća: DO2 (6,50,6 mg l-1), pH (7,70,5), TAN (0,06-1,31 mg l-1), nitrit (0,06-0,60 mg l-1) i nitrat (2,0-32,1 mg l-1), salinitet 5 ppt, temperatura 28±1oC. 12:12 fotofaza:skotofaza je korištena s 30-minutnim zatamnjivanjem svjetala u zoru i sumrak. Ribe su hranjene s udjelom od 4% tjelesne težine d-1 u dva odvojena hranjenja (u 08.00 i 16.00 sati). Razina hranidbenog sirovog proteina i lipida je bila 40%, odnosno 10%.

Spremnici su bili nasumce spajani te je riba bila netretirana, cijepljena ili cijepljena placebo injekcijom. Cjepivo koje je korišteno je eksperimentalni bakterin s adjuvansom „ulje u vodi“ vrste Streptococcus iniae usmrćene formalinom. Riba je vagana i mjerena dvaput mjesečno tijekom 8 tjedana, a težinske grupe su se koristile za prilagođavanje količine hrane. Po završetku testiranja, sve ribe su vagane i mjerene te je izračunat njihov faktor kondicije (CF) i odnos promjene hranjenja (FCR). Visceralno somatski (VSI) i hepatosomatski (HSI) indeksi te intraperitonealna masnoća (IPF) i mišićni odnos (MR) su također procijenjeni. Anesteziranoj ribi se vadila krv i zabilježen je hematokrit. Dopušteno je da se tijekom noći krv zgruša na 5oC nakon čega je zabilježena razina serumskih proteina i izmjerena aktivnost lizozima. Jetra su pripremljena za procjenu mikroniza koristeći se standardnim tehnikama pomoću genskog čipa Danio rerio kako bi procijenili globalne promjene u ekspresiji gena.
Nije primijećena nikakva razlika u konačnoj težini, dužini, CF-u, FCR-u ili HSI-u iako su razlike (P < 0,001) utvrđene za VSI koji je bio viši kod kontroliranih riba. Volumen koncentriranih stanica i razina serumskih proteina slični su u svim grupama (P > 0,05). Promjene u aktivnosti serumskog lizozima tijekom vremena ukazuju na početno smanjenje aktivnosti lizozima, nakon čega slijedi preokret u aktivnosti koji doseže svoj vrhunac 25 dana nakon tretmana. Procjena aktivnosti lizozima u vremenskim razmacima otkrila je razlike (P < 0,05) od 11 do 25 dana nakon cijepljenja. Ispitivanjem zbira podataka hepatičkog mikroniza otkrivena su samo četiri imuno-diskretna gena na koje je cjepivo djelovalo nakon 53 dana, u usporedbi s kontroliranom skupinom. Oni uključuju 'up-regulirani' TCIRG1, ili imunološki regulator T-cell 1 (P < 0,0467) i IL20RA, ili interleukin 20 receptor alfa (P < 0,0433), te 'down-reguliranu' kinazu koja inducira citokin, plk3 (P < 0,01) i protein s imunološkom reakcijom kod miševa, IRG1 (P < 0,01).

Keywords

lizozim; transkriptomika; mikroniz; Streptococcus iniae

Hrčak ID:

93506

URI

https://hrcak.srce.hr/93506

Publication date:

3.10.2012.

Article data in other languages: english

Visits: 1.971 *