Original scientific paper
https://doi.org/10.1515/aiht-2017-68-3060
Istraživanje citotoksičnih, genotoksičnih i citogenetičkih učinaka hidrokinona na ljudskim limfocitima periferne krvi u uvjetima in vitro
Karlo Jurica
; Special Security Operations Directorate, Ministry of the Interior, Zagreb, Croatia
Irena Brčić Karačonji
; Institute for Medical Research and Occupational Health, Zagreb, Croatia
Vesna Benković
orcid.org/0000-0003-3307-1684
; Faculty of Science, University of Zagreb, Zagreb, Croatia
Nevenka Kopjar
; Institute for Medical Research and Occupational Health, Zagreb, Croatia
Abstract
Cilj ovog istraživanja bio je proučiti mehanizme toksičnosti hidrokinona i odnose između njegovih citotoksičnih, genotoksičnih i citogenetičkih učinaka na ljudskim limfocitima periferne krvi izloženima koncentracijama 8, 140 i 280 μg mL-1 tijekom 24 sata. Posljedice izlaganja testiranom spoju istražene su primjenom testa za otkrivanje stanica u apoptozi i nekrozi, komet-testa u alkalnim uvjetima i tzv. cytome inačice citohalazinom blokiranog mikronukleus-testa. Istražene koncentracije hidrokinona izazvale su relativno nisku citotoksičnost u limfocitima, koji većinom ugibaju apoptozom. Međutim, pri istim koncentracijama primjenom komet-testa uočene su značajne promjene u razinama primarnih oštećenja DNA u odnosu na kontrolu. Statistički značajno snižene vrijednosti svih parametara komet-testa u odnosu na kontrolne stanice upućuju na specifične mehanizme međudjelovanja hidrokinona i DNA. Dobiveni rezultati upućuju na mogućnost nastanka ukriženih veza u molekuli DNA (engl. cross-linking) i nastanak adukata u DNA nakon izloženosti dvjema višim koncentracijama hidrokinona, a povišene vrijednosti lomova u DNA, uočene nakon izlaganja najnižoj ispitanoj koncentraciji, upućuju na veći značaj oksidacijskih oštećenja i utjecaj mehanizama povezanih s inhibicijom enzima topoizomeraze II. Pri koncentraciji 8 μg mL-1 hidrokinon ne izaziva značajan porast broja mikronukleusa. Koncentracije 140 i 280 μg mL-1 potpuno koče diobu limfocita, a ujedno izazivaju i stabilizaciju membrana eritrocita, sprječavajuć njihovu lizu. Dva dobivena rezultata značajan su doprinos postojećim saznanjima o toksičnosti hidrokinona: (I.) Ovo je prvo istraživanje u kojem je izmjereno smanjenje ukupne površine kometa limfocitne DNA nakon izlaganja hidrokinonu; (II.) Ovo je prvo istraživanje u kojem je primijenjena cytome inačica mikronukleus-testa, kojom smo dokazali da izloženost čak i vrlo niskim koncentracijama hidrokinona dovodi do značajno povišene učestalosti nastanka jezgrinih pupova u limfocitima. Uzevši u obzir ograničenja limfocita kao modela, ponajprije nedostatak unutarnje metaboličke aktivacije, za nedvojbenu potvrdu dobivenih rezultata predlažemo nastavak istraživanja i na drugim prikladnim modelima staničnih linija.
Keywords
apoptoza; citohalazinom blokiran mikronukleus cytome test; jezgrini pupovi; primarna oštećenja DNA; ukupna površina kometa
Hrčak ID:
191154
URI
Publication date:
20.12.2017.
Visits: 1.696 *