Original scientific paper
https://doi.org/10.5513/JCEA01/20.1.2069
Nová metóda detekcie CRP proteínu na králičích leukocytoch pomocou prietokovej cytometrie
Jaromír Vašiček
orcid.org/0000-0003-4144-8584
; Faculty of Biotechnology and Food Sciences, Slovak University of Agriculture in Nitra, 949 76 Nitra, Slovak Republic
Andrej Balaži
; Research Institute for Animal Production Nitra, National Agricultural and Food Centre, 951 41 Lužianky, Slovak Republic
Ľubomír Ondruška
orcid.org/0000-0002-8460-3137
; Research Institute for Animal Production Nitra, National Agricultural and Food Centre, 951 41 Lužianky, Slovak Republic
Vladimir Parkanyi
; Research Institute for Animal Production Nitra, National Agricultural and Food Centre, 951 41 Lužianky, Slovak Republic
Abstract
C-reaktívny proteín (CRP) je sérový proteín akútnej fázy vylučovaný pečeňovými hepatocytmi. Popri jeho výskyte v sére bolo zistené, že CRP sa nachádza aj na povrchu ľudských leukocytov. Avšak, schopnosť CRP viazať sa na králičie leukocyty, nebola doteraz preskúmaná. Cieľom našej štúdie bolo optimalizovať detekciu králičích leukocytov viažucich CRP pomocou prietokovej cytometrie za účelom sledovania akútnej fázy imunitnej odpovede vyvolanej aplikáciou Kompletného Freundovho adjuvansu (CFA). Vzorky krvi boli analyzované pomocou ELISA metódy a prietokovou cytometriou ihneď pred a 2 dni po aplikácii CFA. Vo vzorkách po CFA imunizácii bol zaznamenaný signifikantný (P<0,01) nárast v podiele CRP+ leukocytov (do 10%) ako aj u ich subpopulácií (u lymfocytov do 14% a granulocytov do 8%). ELISA analýza rovnako odhalila signifikantne (P<0,01) vyššiu koncentráciu CRP v krvnej plazme králikov po CFA imunizácii (okolo 3 mg/L) v porovnaní s kontrolnými vzorkami pred imunizáciou (okolo 1,5 mg/L). Záverom, nárast hladiny CRP proteínu počas imunitnej reakcie u králikov môže byť okrem ELISA metódy merateľný aj pomocou prietokovej cytometrie prostredníctvom leukocytov viažucich CRP. Táto nová metóda by mohla byť úspešne aplikovaná v ďalšom biomedicínskom a veterinárnom výskume.
Keywords
C-reaktívny proteín; ELISA; Kompletný Freundov adjuvans; králičie leukocyty; prietoková cytometria
Hrčak ID:
218103
URI
Publication date:
19.3.2019.
Visits: 2.017 *