Original scientific paper

https://doi.org/10.46419/vs.51.2.3

Razvoj SPE-HPLC-DAD metode za određivanje florfenikola i florfenikol amina u cerebrospinalnoj tekućini svinja

Ksenija Šandor orcid.org/0000-0002-8730-5282 ; Croatian Veterinary Institute, Zagreb, Croatia;
Miroslav Andrišić orcid.org/0000-0001-9221-285X ; Croatian Veterinary Institute, Zagreb, Croatia;
Irena Žarković orcid.org/0000-0002-3263-2024 ; Croatian Veterinary Institute, Zagreb, Croatia;
Eleonora Perak Junaković orcid.org/0000-0003-0630-7428 ; Croatian Veterinary Institute, Zagreb, Croatia
Anja Vujnović orcid.org/0000-0002-8311-9407 ; Croatian Veterinary Institute, Zagreb, Croatia;
Svjetlana Terzić orcid.org/0000-0001-9221-285X ; Croatian Veterinary Institute, Zagreb, Croatia

Abstract

Raspodjela florfenikola (FF) i njegovog metabolita florfenikol amina (FFA) u cerebrospinalnoj tekućini svinja istražena je nakon dvokratne primjene u mišić s 48-satnim razmakom originalnog i generičkog veterinarsko-medicinskog proizvoda (VMP) iste terapijske doze (20 mg FF/kg tjelesne mase) u istim uvjetima pokusa. Oba VMP-a imaju odobrenje za stavljanje u promet u Hrvatskoj te su po farmaceutskom obliku otopine za injekcije i sadržavaju 300 mg FF/mL. Pokus je proveden na klinički zdravim svinjama raspoređenim u dvije pokusne i jednu kontrolnu skupinu. Prvoj pokusnoj skupini životinja primijenjen je originalni, drugoj skupini generički lijek, dok je treća skupina bila kontrolna. Žrtvovanje životinja uslijedilo je nakon 216, 288 i 384 sata od prvog davanja VMP-a. Uzorci cerebrospinalne tekućine prikupljeni su u trenutku žrtvovanja i analizirani su optimiranom i validiranom tekućinskokromatografskom metodom uz detekciju UV-detektorom s nizom fotodioda (HPLC-DAD). Obrada uzoraka cerebrospinalne tekućine provedena je ekstrakcijom na čvrstoj fazi C18 (SPE). Primjenom SPE-HPLC- DAD metode ustvrđeno je da matrica ne utječe na linearnost FF i FFA u radnom području od 0,05 do 5,00 μg/mL te je postignuta granica detekcije od 0,0023 μg/mL za FF i od 0,0100 μg/mL za FFA. Vrijednosti analitičkih povrata kreću se od 86,6 % do 111,8 % za FF, odnosno od 91,7% do 98,8% za FFA. U ovom radu je dokazano da je SPE-HPLC-DAD metoda selektivna, osjetljiva i pouzdana analitička metoda za određivanje FF i FFA u cerebrospi- nalnoj tekućini. S obzirom na rezultate našeg preliminarnog istraživanja FF u plazmi svinja tretiranih originalnim, odnosno generičkim VMP-om, cilj ovog istraživanja bila je i usporedba distribucije FF u uzorcima plazme i cerebrospinalne tekućine svinja nakon 216. sata od primjene VMP-a. Međutim, u uzorcima cerebrospinalne tekućine svinja žrtvovanih u navedenom pokusnom razdoblju nisu detektirani ni FF ni FFA. Zbog sličnosti matrica, SPE-HPLC-DAD metoda mogla bi poslužiti u budućim farmakokinetičkim studijama FF u uzorcima plazme i seruma dobivenim od svi- nja nakon primjene u mišić.

Keywords

florfenikol; florfenikol amin; svinje; cerebrospinalna tekućina; veterinarsko-medicinski proizvodi; HPLC-DAD

Hrčak ID:

236166

URI

https://hrcak.srce.hr/236166

Publication date:

25.3.2020.

Article data in other languages: english

Visits: 1.848 *