Original scientific paper
Inhibiranje ekspresije receptora lizofosfatidne kiseline-2 RNA interferencijom smanjuje aktivaciju urokinaza plazminogen aktivatora induciranog lizofosfatidnom kiselinom, invaziju stanica i migraciju u SKOV-3 stanicama raka jajnika
Gui-li Wang
; Department of Obstetrics and Gynecology, Shandong Provincial Hospital, People's Republic of China
Ze-qing Wen
; Department of Obstetrics and Gynecology, Shandong Provincial Hospital, People's Republic of China
Wan-peng Xu
; Department of Surgery, Hospital of Weifang Medical University, Weifang, China
Zhi-yu Wang
; Ministry of Health, Jinan, China
Xue-lian Du
; Department of Obstetrics and Gynecology, Shandong Provincial Hospital, People's Republic of China
Fei Wang
; Department of Obstetrics and Gynecology, Shandong Provincial Hospital, People's Republic of China
Abstract
Cilj Istražiti ulogu receptora lizofosfatidne kiseline-2 (LPA2) u reguliranju urokinaza plazminogen aktivatora induciranog lizofosfatidnom kiselinom (uPA), staničnoj invaziji, i migraciji u ljudskim stanicama raka jajnika stanična linija SKOV-3.
Postupci SKOV-3 su stimulirane s LPA. uPA razina u staničnom nadtalogu i njegova aktivnost mjereni su rabeći enzimski imunotest. LPA2 mRNA ekspresija je inhibirana koristeći LPA2-specifičnu malu interferencijsku RNA (siRNA) i mjerena semi-kvantitativnom lančanom reakcijom polimerazom uz reverznu transkriptazu. LPA-inducirana stanična invazija mjerena je pomoću Matrigel invazivne komore, a migracija u transfektiranm stanicama pomoću Transwell kemotaksične komore.
Rezultati LPA stimulacija je značajno povećala in vitro uPA aktivnost u ovisnosti o vremenu i dozi. Razine LPA-induciranog uPA proteina smanjile su se za 55% u LPA2 siRNA-transfektiranim stanicama u usporedbi s negativno transfektiranim stanicama 24 sata nakon što su tretirane s 80 μmol/L LPA (0,75±0,03 vs 0,34±0,04, P=0,004). U LPA2 specifičnim siRNA-transfektiranim SKOV-3 stanicama, stimulacija sa 80 μmol/L LPA inducirala je zamjetno manju invaziju i migraciju u usporedbi s negativnim kontrolnim siRNA-transfektiranim SKOV-3 stanicama (invazija: 178±17,2 vs 36.2±3,3, P=0,009; migracija: 220,4±25,5 vs 57±7,6, P=0,009).
Zaključak LPA2 ima ključnu ulogu u LPA-induciranoj uPA aktivaciji i staničnoj invaziji u stanicama raka jajnika SKOV-3.
Keywords
RNA; LPA stimulacija; pokusi na životinjama
Hrčak ID:
26101
URI
Publication date:
15.4.2008.
Visits: 1.951 *