Original scientific paper

Dokaz virusa newcastleske bolesti molekularnim postupkom FTA-PCR

Madaboosi S. Narayanan ; Department of Animal Biotechnology, Madras Veterinary, College, Tamil Nadu, India
Manoharan Parthiban ; Department of Animal Biotechnology, Madras Veterinary, College, Tamil Nadu, India
Padmanabhan Sathiya ; Department of Animal Biotechnology, Madras Veterinary, College, Tamil Nadu, India
Kathaperumal Kumanan ; Department of Animal Biotechnology, Madras Veterinary, College, Tamil Nadu, India

Abstract

Istražena je mogućnost uporabe Flinders tehnologije s filtrirnim papirom za pohranjivanje alantoisne tekućine zaražene virusom newcastleske bolesti i uzoraka tkiva radi molekularnog dokazivanja toga virusa lančanom reakcijom polimerazom uz prethodnu reverznu transkripciju (RT-PCR). Flinders kartica celulozna je membrana pripravljena na osnovi pamuka s liofiliziranim kemikalijama koje liziraju viruse i bakterije. Virusna RNA mogla se na takvoj kartici dokazati u količini od 107,6 EID50/100 μL (100 puta manje razrjeđenje
od 109,6 EID50/100 μL osnovne suspenzije). Inaktivirani virus bio je stabilan na karticama tijekom 30 dana pri sobnoj temperaturi i 4 ºC. Virus je bio dokazan RT-PCR-om u svima Flinders tehnologijom pripravljenim otiscima cekalnih tonzila, bubrega, voljke, slezene, dušnika, obriscima fecesa i crijevnih lezija ptica sumnjivih na newcastlesku bolest. Virus je bio inaktiviran nakon dodira s FT fifi ltrirnim papirom što je bilo potvrđeno činjenicom da se nije više mogao uzgojiti u kokošjim embrijima ni na kulturi fibroblasta podrijetlom od kokošjih embrija. Zaključuje se da su FT papirići prikladni za uzimanje i prijenos uzoraka koji sadrže virus newcastleske bolesti bez potrebe pohranjivanja u hladnom prostoru. Virus inaktiviran na FT papiriću (kartici) odgovarajući je izvor virusne RNA za njegov molekularni dokaz i identifikaciju.

Keywords

virus newcastleske bolesti; filtrirni papir; molekularni dokaz

Hrčak ID:

53098

URI

https://hrcak.srce.hr/53098

Publication date:

8.3.2010.

Article data in other languages: english

Visits: 2.526 *