Izvorni znanstveni članak

Identificiranje i tipiziranje Leptospira spp. primjenom metode raznolikosti dužine restrikcijskih fragmenata rDNK za gen 16S (RFLP) i gel elektroforeze u pulsirajućem polju (PFGE)

Nenad Turk ; Veterinarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu, Laboratorij za leptospire, Zagreb, Hrvatska
Zoran Milas ; Veterinarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu, Laboratorij za leptospire, Zagreb, Hrvatska
Josipa Habuš ; Veterinarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu, Laboratorij za leptospire, Zagreb, Hrvatska
Zrinka Štritof ; Veterinarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu, Laboratorij za leptospire, Zagreb, Hrvatska
Vesna Mojčec ; Veterinarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu, Laboratorij za leptospire, Zagreb, Hrvatska
Zvonko Modrić ; Veterinarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu, Laboratorij za leptospire, Zagreb, Hrvatska
Vilim Starešina ; Veterinarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu, Laboratorij za leptospire, Zagreb, Hrvatska
Daniele Postic ; Laboratorie des spirochetes, Institut Pasteur, Paris, France

Sažetak

Ukupno 13 izolata bakterije roda Leptospira izdvojenih iz domaćih i divljih životinja iz kontinentalnog dijela Republike Hrvatske identificirano je najprije serološki metodom mikroskopske aglutinacije (MAT), a zatim genetski uporabom molekularnih metoda; raznolikosti dužine restrikcijskih fragmenata rDNK za gen 16S (RFLP) te gel elektroforeze u pulsirajućem polju (PFGE). Mikroskopskom aglutinacijom s 23 hiperimuna seruma seroloških skupina ustanovljeno je da pet izolata pripada serološkoj skupini Pomona, po dva izolata serološkoj skupini Bataviae, Canicola i Icterohaemorrhagiae i po jedan serološkoj skupini Australis i Grippotyphosa. Umnažanjem početnih 330 bp rDNK za gen 16S analiziranih izolata leptospira i mikrorestrikcije umnoženih fragmenata DNK s restrikcijskim enzimima MnlI i DdeI ustanovljeno je da svi izolati pripadaju genomskoj vrsti L. interrogans sensu stricto. Makrorestrikcijom čitave genomske DNK pretraživanih izolata leptospira s restrikcijskim enzimima NotI i SgrAI i gel elektroforezom u pulsirajućem polju ustanovljeno je osam različitih serovara: Copenhageni (1), Icterohaemorrhagiae (1), Bataviae (2), Pomona (4), Pomona Kennewicki (1), Canicola (2), Lora (1) i Grippotyphosa (1). Budući smo od 13 izolata leptospira na osnovi analize razlika u restrikcijskim profilima ustanovili osam različitih serovara, smatramo kako u Republici Hrvatskoj, osobito u nizinama Save i Drave postoji velika genetska raznolikost leptospira unutar jedne genomske vrste, Leptospira interrogans sensu stricto.

Ključne riječi

leptospiroza; leptospira; molekularno tipiziranje; RFLP; PFGE

Hrčak ID:

43725

URI

https://hrcak.srce.hr/43725

Datum izdavanja:

2.12.2008.

Podaci na drugim jezicima: engleski

Posjeta: 2.217 *