Izvorni znanstveni članak
Prijenos gena za proizvodnju opina (Agrobacterium pRi TL-DNA rolB i TR-DNA) u stanice zrnatog šćira Amaranthus spinosus L.
Ajantaa Pal
; Plant Cell and Tissue Culture Facility, Post-Graduate Department of Botany, Utkal University, Bhubaneswar-751004, Orissa, India
Swasti S. Swain
; Plant Cell and Tissue Culture Facility, Post-Graduate Department of Botany, Utkal University, Bhubaneswar-751004, Orissa, India
Arup K. Mukherjee
; DNA Fingerprinting Laboratory, Division of Plant Biotechnology, Regional Plant Resource Centre, Bhubaneswar-751015, Orissa, India
Pradeep K. Chand
; Plant Cell and Tissue Culture Facility, Post-Graduate Department of Botany, Utkal University, Bhubaneswar-751004, Orissa, India
Sažetak
Inokulacijom eksplantata (internodija ili listova) zrnatog šćira Amaranthus spinosus L. sa četiri divlja soja bakterije Agrobacterium rhizogenes dobiven je karakterističan uzorak transformiranog korijenja nakon in vitro rizogeneze. Stupanj rizogeneze uvelike je ovisio o upotrijebljenom tipu i porijeklu eksplantata te soju bakterije, pri čemu su bolji rezultati dobiveni inokulacijom internodija, nego pomoću listova šćira. Soj A. rhizogenes LBA 9042, koji posjeduje plazmid pRi 1855, bio je najvirulentniji i najinfektivniji, pa je uzrokovao pojavu čupavog (adventivnog) korijenja u maksimalnom broju eksplantata, neovisno o njihovom tipu. Pojedinačni klonovi transgenog korijenja uzgajani su na hranjivoj podlozi Murashige i Skoog, bez dodatka regulatora rasta. Prisutnost gena rolB u segmentu TL-DNA plazmida Ri iz bakterije Agrobacterium u lisnom tkivu biljaka regeneriranih iz odabranih klonova potvrđena je pozitivnim rezultatom PCR umnožavanja DNA. PCR umnožavanjem i analizom opina utvrđeno je da genetički transformirane biljke mogu primiti i eksprimirati TRDNA-specifične gene (man2 i ags) za sintezu karakterističnih opina. Rezultati upućuju na to da se transformirano korijenje šćira može upotrijebiti u farmaceutici, te da se transgenim uzgojem ova važna žitarica može zaštititi od biotičkog stresa.
Ključne riječi
Amaranthus spinosus L.; Agrobacterium rhizogenes; transgeno korijenje; PCR umnožavanje; analiza opina
Hrčak ID:
99744
URI
Datum izdavanja:
29.3.2013.
Posjeta: 2.743 *