Original scientific paper

https://doi.org/10.20471/acc.2025.64.01.10

Optimizacija sustava HCV kultura stanica za evaluaciju antivirusnih lijekova protiv HCV genotipova 2a i 4a

Naiera M. Helmy ; Microbial Biotechnology Department, Biotechnology Research Institute, National Research Center, Giza, Egypt
Reem El-Shenawy ; Microbial Biotechnology Department, Biotechnology Research Institute, National Research Center, Giza, Egypt
Tawfeek H. Abdelhafez ; Microbial Biotechnology Department, Biotechnology Research Institute, National Research Center, Giza, Egypt
Ashraf A. Tabll ; Microbial Biotechnology Department, Biotechnology Research Institute, National Research Center, Giza, Egypt; Egypt Center for Research and Regenerative Medicine (ECRRM), Cairo, Egypt
Ana Petrović ; Josip Juraj Strossmayer University of Osijek, Faculty of Dental Medicine and Health in Osijek, Osijek, Croatia
Elizabeta Horvatić ; Josip Juraj Strossmayer University of Osijek, Faculty of Dental Medicine and Health in Osijek, Osijek, Croatia
Martina Smolić ; Josip Juraj Strossmayer University of Osijek, Faculty of Dental Medicine and Health in Osijek, Osijek, Croatia
Dominik Gjoni ; Josip Juraj Strossmayer University of Osijek, Faculty of Dental Medicine and Health in Osijek, Osijek, Croatia
Robert Smolić ; Josip Juraj Strossmayer University of Osijek, Faculty of Dental Medicine and Health in Osijek, Osijek, Croatia *

* Corresponding author.

Abstract

Procjena infekcije virusom hepatitisa C (HCV) u staničnoj kulturi važna je za razvoj novih antivirusnih lijekova i za
razumijevanje životnog ciklusa virusa, kao i za proučavanje korelacije među genotipovima koji se šire diljem svijeta. Razvoj
sustava HCV stanične kulture predstavlja veliku prednost jer omogućava rast virusa u staničnoj kulturi, što otvara mogućnost
otkrivanja potencijalnih lijekova i cjepiva. Cilj ovog istraživanja bio je prikazati korake infekcije HCV-om u sustavu stanične
kulture kao pokazatelje za učinkovitost snažnijih antivirusnih spojeva. Dva plazmida, JFH1 (genotip 2a) pune duljine i 4a
(ED43/C-NS2/NS5A) podvrgnuta su in vitro transkripciji radi sinteze HCV RNA, nakon čega je uslijedila transfekcija
Huh7.5 stanica s dobivenom RNA iz svakog genotipa kako bi se generirao virus. Kasnije su Huh7.5 stanice zaražene
repliciranim virusom rezultirale stvaranjem stanica zaraženih HCV-om. Imunobojanje zaraženih stanica pokazalo je
fluorescenciju zelene boje, što ukazuje na pozitivnu infekciju oba genotipa, 2a i 4a. Usto, provedena je i real-time lančana
reakcija polimerazom radi mjerenja virusnog opterećenja iz ekstrahiranih stanica prethodno zaraženih s RNA genotipova 2
i 4, što je rezultiralo s 32.500, odnosno 107.375 kopija/mL. Zaključno, uvođenje sustava HCV stanične kulture predstavlja
prikladnu metodu za procjenu aktivnih antivirusnih lijekova protiv HCV genotipova 2a i 4a korištenjem kvalitativnih i
kvantitativnih tehnika u razlikovanju učinkovitosti antivirusnih lijekova.

Keywords

Hepatitis C virus; Infekcija; Huh7.5; JFH1; Genotip 4

Hrčak ID:

335721

URI

https://hrcak.srce.hr/335721

Publication date:

31.3.2025.

Article data in other languages: english

Visits: 722 *