Original scientific paper
Pročišćavanje i svojstva ekstracelularne endoinulinaze iz soja Aspergillus niger 20 OSM
Marcin Skowronek
; Department of Industrial Microbiology, Maria Curie-Sk³odowska University, PL-20-031 Lublin, Poland
Jan Fiedurek
; Department of Industrial Microbiology, Maria Curie-Sk³odowska University, PL-20-031 Lublin, Poland
Abstract
Ekstracelularna inulinaza (E.C. 3.2.1.7), proizvedena pri uzgoju Aspergillus niger 20 OSM u dvolitrenom fermentoru, izolirana je i pročišćena ionskom kromatografijom na DEAE sefarozi hidrofobnom interakcijom na fenil sefarozi, kromatofokusiranjem na koloni PBE-94 (Polybuffer Exchanger) te SEC kromatografijom (Size Exclusion Chromatography) na Sephadexu G-200. Enzim je homogen, sudeći prema SDS-PAGE elektroforezi, prividne M. SKOWRONEK and J. FIEDUREK: Extracellular Endoinulinase from A. niger, Food Technol. Biotechnol. 44 (1) 53–58 (2006) 57 relativne molekularne mase od 69 ili 64 kDa, određene SEC kromatografijom. Enzim sadržava približno 44,5 % ugljikohidrata. Za enzimsku aktivnost optimalna je temperatura 55 °C uz pH=5,0. Određena su i neka fizikalno-kemijska svojstva (izoelektrična točka, Km, Vmax i Ea). Enzimska je aktivnost inhibirana s EDTA, pCMB, Hg2+, Mn2+ i nekim drugim ionima metala. Kationi kalcija pozitivno su utjecali na enzimsku aktivnost. Kromatografijom na tankom sloju ustanovljeno je da je pročišćeni enzim tipična enodoinulinaza.
Keywords
Hrčak ID:
109755
URI
Publication date:
15.3.2006.
Visits: 1.210 *