Original scientific paper
Usporedba protokola za mjerenje aktivnosti kolinesteraza u ljudskoj krvi Ellmanovom metodom
Elsa Reiner
Goran Šinko
Mira Škrinjarić-Špoljar
Vera Simeon-Rudolf
Abstract
Mjerenjem aktivnosti acetilkolinesteraze i butirilkolinesteraze u krvi može se u osoba izloženih organofosfornim spojevima i karbamatima odrediti apsorpcija tih spojeva. Za mjerenje aktivnosti butirilkolinesteraze u ljudskoj plazmi postoji standardizirani protokol usvojen u velikom broju kliničkih i toksikoloških laboratorija, dok za mjerenje aktivnosti eritrocitne acetilkolinesteraze ima nekoliko predloženih protokola, ali ni jedan još nije opće privaćen. Zajednički princip svih predloženih protokola je spektrofotometrijska Ellmanova metoda, koja za mjerenje aktivosti kolinesteraza rabi tiokolinske supstrate. Autori ovoga rada predlažu jednostavni protokol u kojem se zasebno mjere aktivnosti u plazmi i u eritrocitima, koji nisu prani, a koji se odvoje centrifugiranjem. Aktivnost u eritrocitima mjeri se nakon hemolize eritrocita smrzavanjem. MjerI se samo s 1,0 mM acetiltiokolinom. Drugi autori mjere aktivnost u punoj krvi koristeći se dvama supstratima (acetiltiokolinom i butiriltiokolinom), koji se u hemoliziranu krv dodaju sukcesivno i nakon svakog dodavanja supstrata mjeri se aktivnost. Neki autori predlažu uporabu etopropazina, specifičnog inhibitora butirilkolinesteraze, pa se mjerenje vrši u prisutnosti i odsutnosti toga inhibitora. U ovome su radu opisane prednosti i nedostaci pojedinog protokola te izvori mogućih pogrešaka u predloženim postupcima. Za usvajanje standardiziranog protokola za mjerenje aktivnosti eritrocitne kolinesteraze potreban je dogovor autora predloženih protokola nakon čega bi trebala uslijediti međulaboratorijska provjera toga protokola.
Keywords
acetilkolinesteraza; butirilkolinesteraza; ljudska plazma; ljudski eritrociti; preciznost mjerenja; etopropazin
Hrčak ID:
884
URI
Publication date:
29.9.2000.
Visits: 6.556 *