Original scientific paper

Konstrukcija mutanta bakterije Zymomonas mobilis pomoću mjesno-specifične FLP rekombinaze

Shao-Lan Zou ; Biomass Conversion Laboratory, Tianjin R&D Center For Petrochemical Technology, Tianjin University, Tianjin, 300072, P.O. Box 6888, PR China
Jie-Fang Hong ; Biomass Conversion Laboratory, Tianjin R&D Center For Petrochemical Technology, Tianjin University, Tianjin, 300072, P.O. Box 6888, PR China
Cui Wang ; Biomass Conversion Laboratory, Tianjin R&D Center For Petrochemical Technology, Tianjin University, Tianjin, 300072, P.O. Box 6888, PR China
Xin Jing ; Biomass Conversion Laboratory, Tianjin R&D Center For Petrochemical Technology, Tianjin University, Tianjin, 300072, P.O. Box 6888, PR China
Min-Hua Zhang ; State Key Laboratory of Engines, Tianjin University, Tianjin, 300072, P.O. Box 6888, PR China

Abstract

U ovom je radu u soju bakterije bakterije Zymomonas mobilis ZM4 eksprimirana flipaza iz kvasca Saccharomyces cerevisiae. Najprije je homolognom rekombinacijom u bakterijski kromosom ugrađen selektivni biljeg omeđen FRT sekvencijama. Potom je u bakteriju unesen plazmid pBBR1MCS-2 koji sadrži kvaščev gen Flp pod regulacijom promotora gena gap iz soja ZM4 (Pgap, koji kodira za gliceraldehid-3-fosfat dehidrogenazu) ili cI857-PR iz bakteriofaga λ. Gen Flp uspješno je eksprimiran, te je učestalost gubitka selektivnog markera omeđenog FRT sekvencijama iznosila približno 100 %. Osim toga, vektor za ekspresiju gena Flp lako je uklonjen trostrukim precjepljivanjem na podlogu bez antibiotika, pa se može zaključiti da je razvijena učinkovita metoda za uklanjanje selektivnog biljega iz transformanata bakterije Zymomonas mobilis.

Keywords

Zymomonas mobilis; homologna rekombinacija; ekspresija flipaze; transformacija; mutant

Hrčak ID:

94486

URI

https://hrcak.srce.hr/94486

Publication date:

27.12.2012.

Article data in other languages: english

Visits: 1.973 *