Original scientific paper
Utjecaj dodatka aminokiselina i frakcioniranja otapalom na in vitro antioksidativnu aktivnost hidrolizata kazeina modificiranih plastein reakcijom
Nan Yue
; Key Laboratory of Dairy Science, Ministry of Education, Northeast Agricultural University, 150030 Harbin, PR China
Tie-Jing Li
; Department of Food Science, Northeast Agricultural University, 150030 Harbin, PR China
Xin-Huai Zhao
; Department of Food Science, Northeast Agricultural University, 150030 Harbin, PR China
Abstract
Za pripremu hidrolizata kazeina stupnja hidrolize od 9,4 % upotrijebljen je enzim papain. Dobiveni je hidrolizat imao in vitro antioksidativnu aktivnost tj. sposobnost uklanjanja DPPH radikala od 38,7 % i EC50 vrijednost od 1,63 mg/mL. Dodatkom fenilalanina ili tirozina potaknuta je plastein reakcija katalizirana pomoću papaina. Metodom odzivnih površina optimirani su sljedeći parametri pri vremenu reakcije od 5 h: temperatura od 30 °C, koncentracija supstrata od 50 % (m/V), udjel enzima od 3 kU/g peptida i udjel aminokiselina od 0,74 mol/mol slobodnih aminokiselinskih grupa hidrolizata. Pripremljeno je nekoliko modificiranih hidrolizata, te je ispitana njihova antioksidativna aktivnost, i to sposobnost uklanjanja DPPH radikala i reducirajuća snaga. Dobiveni su rezultati pokazali da su svi modificirani hidrolizati imali znatno veću sposobnost uklanjanja radikala (p<0,05) i reducirajuću snagu od izvornih hidrolizata, a među njima je bio i jedan s najnižom EC50 vrijednosti od 1,09 mg/mL. Frakcioniranjem modificiranog hidrolizata najveće antioksidativne aktivnosti pomoću etanola i vode u omjerima od 3:7, 4:6, 5:5 i 6:4 dobiveni su supernatanti ili precipitati veće ili manje antioksidativne aktivnosti i reducirajuće snage, naročito pomoću otapala male polarnosti (npr. omjera etanola i vode od 6:4). Supernatanti s najvećom aktivnošću imali su EC50 vrijednost od 0,69 mg/mL. Rezultati pokazuju da se dodatkom fenilalanina ili tirozina u plastein reakciji hidrolizata kazeina te daljnjim frakcioniranjem otapalom mogu dobiti modificirani hidrolizati veće antioksidativne aktivnosti.
Keywords
hidrolizat kazeina; antioksidativna aktivnost; fenilalanin i tirozin; papain; plastein reakcija; frakcioniranje otapalom
Hrčak ID:
104711
URI
Publication date:
28.6.2013.
Visits: 2.120 *