Original scientific paper
https://doi.org/10.17113/ftb.57.03.19.6028
Uklanjanje slobodnih radikala i indukcija apoptoze pomoću frakcije FA, dobivene proteolizom bioaktivnih peptida izoliranih iz mikroalge Synechococcus sp. VDW
Rutairat Suttisuwan
; Program in Biotechnology, Faculty of Science, Chulalongkorn University, 254 Phayathai Road, Wangmai, Pathumwan, Bangkok 10330, Thailand
Saranya Phunpruch
; Bioenergy Research Unit, Faculty of Science, King Mongkut’s Institute of Technology Ladkrabang, Chalongkrung Road, Ladkrabang, Bangkok 10520, Thailand
Tanatorn Saisavoey
; Institute of Biotechnology and Genetic Engineering, Chulalongkorn University, 254 Phayathai Road, Pathumwan, Bangkok 10330, Thailand
Papassara Sangtanoo
; Institute of Biotechnology and Genetic Engineering, Chulalongkorn University, 254 Phayathai Road, Pathumwan, Bangkok 10330, Thailand
Nuttha Thongchul
; Research Unit in Bioconversion/ Bioseparation for Value-Added Chemical Production, Institute of Biotechnology and Genetic Engineering, Chulalongkorn University, 254 Phayathai Road, Wangmai, Pathumwan, Bangkok 10330, Thailand
Aphichart Karnchanatat
orcid.org/0000-0002-6598-013X
; Research Unit in Bioconversion/ Bioseparation for Value-Added Chemical Production, Institute of Biotechnology and Genetic Engineering, Chulalongkorn University, 254 Phayathai Road, Wangmai, Pathumwan, Bangkok 10330, Thailand
Abstract
Svrha ovog istraživanja bila je odrediti antioksidacijsku aktivnost bioaktivnih peptida izoliranih iz stanica mikroalge Synechococcus sp. VDW nakon 21 dana uzgoja. Hidrolizati proteina iz mikroalge Synechococcus sp. VDW dobiveni su pomoću tripsina, te su zatim pročišćeni ultrafiltracijom pomoću membrana veličine od 10, 5 i 3 kDa. Frakcija proteina FA molekularne mase od 3 kDa imala je najveću sposobnost uklanjanja slobodnih radikala 2,2'-azino-bis(3-etilbenzotiazolin-6-sulfonske kiseline) (ABTS), IC50 vrijednosti od (11,5±0,3) μg/mL, i 2,2'-difenil-1-pikrilhidrazila (DPPH), IC50 vrijednosti od (13,6±0,2) μg/mL. Frakcija proteina FA razdvojena je pomoću HPLC kromatografije obrnutih (reverznih) faza u četiri podfrakcije (F1–4). Subfrakcija F4 imala je maksimalni učinak uklanjanja ABTS radikala od (3,55±0,61) %, pa je odabrana za daljnju analizu pomoću metode ESI-Q-TOF-MS/MS, temeljene na sekvenciranju peptida de novo. Identificirano je pet peptida s antioksidacijskim učinkom, od kojih je najveću sposobnost uklanjanja ABTS radikala imao peptid AILESYSAGKTK. Nadalje, frakcija FA imala je snažan citotoksični učinak na stanične linije humanih karcinoma, pogotovo staničnu liniju raka debelog crijeva (SW620), pri čemu je IC50 vrijednost bila (106,6±21,5) μg/mL, no nije imala citotoksični učinak na netransformiranu staničnu liniju Wi38. Uzrokovala je početak apoptoze u staničnoj liniji SW620 nakon 24, 48 i 72 sata, s najvećom aktivnosti kaspaza 3, 8 i 9 nakon 72 sata. Dobiveni rezultati pokazuju da se mikroalga Synechococcus sp. VDW može upotrijebiti za proizvodnju prirodnih antitumorskih lijekova.
Keywords
antioksidans; apoptoza; karcinom; hidrolizat proteina; Synechococcus sp. VDW; stanična linija SW620
Hrčak ID:
227290
URI
Publication date:
30.9.2019.
Visits: 1.226 *